akta primer 层析系统在天然产物分离中-实验

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时间:2019-05-09

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1、AKTAPrimer层析系统的应用技术专业基础实验PrinciplesofOperationfor ChromatographyTechniques现代柱层析技术的原理GelFiltrationIonExchangeHydrophobicInteractionAffinityReversedPhase基本知识层析介质硅胶氧化铝聚酰胺大孔树脂分子筛凝胶离子交换凝胶亲和层析介质反相层析介质基本知识AKTA--分离和纯化各类生物分子天然蛋白质重组和融合蛋白质肽类寡核苷酸质粒病毒抗生素生物碱,TCM。。。。。。等等基本知识AKTAPrimer系统组成AKTAPrime+PrimeViewAKTAPr

2、imerAKTAPrime主机组分收集器控制面板系统泵AKTAPrimerAKTAPrime主机AKTAPrimerAKTAPrime流程图AKTAPrimerAKTAPrime流程图面板操作按钮及简要操作命令面板操作按钮面板操作按钮按OK进入子菜单;按ESC退到上级菜单;按上下箭头,可选择菜单命令、调整参数等。面板操作按钮分布收集器前进一管停止程序或方法运行梯度运行过程中,按此键,系统将保持当前浓度运行,而流速和分步收集继续,再按一下,继续梯度运行按此键,系统暂停运行,包括泵和收集,再按一下,继续操作命令简介主菜单预编好的方法模板运行保存的方法手动运行编辑方法将方法拷入电脑或拷回检查系统状

3、态设定系统参数子菜单以ManualRun为例:操作命令简介单位ml、min浓度%B收集单位ml、min、drop收集数量(每管)限压(保护层析柱)MPa缓冲阀位1-8样品阀位waste、load、inject开始梯度(长度ml/目标浓度%B)流速ml/minPrimeView——软件系统-数据采集AKTAPrimer运行曲线图谱(Curve):记录系统采集到的全部数据,系统开始运行后,自动开始记录,结束后,自动保存。运行日志(Logbook):记录系统收到的所有指令AKTAPrimerPrimeView——数据采集选择浏览曲线及设定曲线颜色设定X,Y轴的坐标范围AKTAPrimer实验题目—

4、—蛋白质脱盐实验目的1.了解层系技术的理念,基本操作和应用2.掌握分子筛层析的原理,了解其用途;3.熟悉AKTAPrime的操作。实验原理实验的基本内容实验材料层析介质葡聚糖凝胶——G25分离对象脱除含1M硫酸铵的小牛血清中的盐实验试剂0.15M的氯化钠溶液实验注意事项设置限压0.3MPa。排尽注射器内的空气,从上样阀注入样品环,注射器放在原位不拔出。实验思考题蛋白质分离纯化的方法有哪些?请列举2种以上,并阐述其原理。利用凝胶层析法分离混合样品时,怎样才能得到较好的分离效果?现有含谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、赖氨酸(Lys)、精氨酸(Arg)和组氨酸(His)的混合溶液,请设计一个实

5、验对其进行分离,写出实验基本步骤并预测实验结果。

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