艾滋病、梅毒实验室检测

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1、艾滋病、梅毒实验室检测方法及生物安全高金亮博士分子生物学主任技师鄂尔多斯市疾病预防控制中心2013年1月15日艾滋病，即获得性免疫缺陷综合症（acquiredimmunedeficencysyndrome,AIDS)。是人类因为感染人类免疫缺陷病毒（HumanImmunodeficiencyVirus，HIV）后导致免疫缺陷，并发一系列机会性感染及肿瘤，严重者可导致死亡的综合征。目前，艾滋病已成为严重威胁世界人民健康的公共卫生问题。艾滋病艾滋病的发现美国1981年首先发现5名同性恋中患卡氏肺孢子虫肺炎，数月后又在另外数例同性恋中

2、发现卡波济氏肉瘤，相同的情况也出现在静脉吸毒人群中。均有免疫功能减退，主要是CD4+T细胞的数减少。称为获得性免疫缺陷综合症。同年6月5日美国CDC最先向全世界报道AIDS。1983年，美国马里兰大学RobertGallo等从艾滋病病人体内分离到一种与人类T淋巴细胞白血病病毒(HTLV)非常相似的病毒，遂将该新发现的病毒命名为人类T淋巴细胞白血病III型病毒（HTLV-III）（Science220(4599):865–867）。与此同时，法国巴斯德研究所的LucMontagnier等从一颈部淋巴结肿大、体质虚弱的艾滋病患者体内

3、分离到一种病毒，该病毒的核心蛋白与HTLV-I的免疫学特性不同，遂将该病毒命名为淋巴腺病相关病毒(LAV)（Science220(4599):868–871）。后经证实这两种病毒为同一种病毒，于1986年将该病毒更名为HIV。同年在非洲发现异性间传播并发现HIV-2。WHO报告2010年全球约有3400万人感染HIV，新感染270万，全年死亡180万人。每天有超过7000人新发感染。世界各地区均有流行，但97%以上在中、低收入国家，尤以非洲为重。在2011年年底各国青壮年（15-49岁）艾滋病的流行程度估计艾滋病流行状况2008

4、年底各国艾滋病患者及HIV携带者人数估计1、发现：1985年，一位美籍阿根廷青年以旅游者的身份进入中国，不久便因发烧、肺部感染住进北京协和医院，因该患者对各种抗感染类药物均没有作用，随后进行的血清检测发现其HIV呈阳性。2、流行现状：中国CDC估计，截止至2011年底，我国存活HIV携带者及艾滋病患者约78万人，全年新发感染者4.8万人，死亡2.8万人。疫情已覆盖全国所有省、自治区、直辖市，目前我国面临艾滋病发病和死亡的高峰期，且已由吸毒、暗娼等高危人群开始向一般人群扩散。2009年疫情估计结果显示，云南、广西、河南、四川、新疆

5、、广东等6省HIV感染者超过5万人，占全国估计总数的61.8%；1～5万人的省份有9个；5千人以下的省份有8个，占全国估计总数的2.3%。累计报告艾滋病病毒感染者和病人数排在后7位的省份是西藏、青海、宁夏、内蒙、天津、甘肃、海南，报告人数不到全国报告总数的1%。中国AIDS流行情况病原学1、病原体AIDS的病原体是人类免疫缺陷病毒（HIV）。HIV属于反（逆）转录病毒科，慢病毒属人类免疫缺陷病毒组。2、病毒形态结构HIV呈球形或椭球形，直径100-120nm电镜下成熟的HIV-1呈现一致密的圆柱状核心和一个病毒包膜。外层为类脂质

6、包膜，膜上为突起插入，突起由糖蛋白（gp120）和跨膜蛋白（gp41）以共价键连接而成。病毒核心由病毒RNA、逆转录酶、整合酶和蛋白酶，有核心蛋白p24、P6、P9包裹HIV的RNA为两条相同拷贝（完全同源）的正股RNA链。HIV的形态HIV的逆转录酶缺乏3’—5’核酸外切酶活性，无法修复逆转录和复制过程中发生的错误。HIV颗粒3、HIV的基因结构及分型HIV可分为HIV-Ⅰ和HIV-Ⅱ两型。HIV-1全长9181bp,HIV-2全长10359bp.（1）基因组成：HIV含3个结构基因和6个调节基因Ⅰ:LTR-gag-pol-v

7、if-vpr-tat-rev-vpu-env-nef-LTR.Ⅱ:LTR-gag-pol-vif-vpx-vpr-tat-rev-env-nef-LTR.(2)两者的主要区别：①Ⅰ型含有vpu，而Ⅱ型含vpx。②vpr和nef与其他基因的关系也不同：AHIV-Ⅰ的vpr与vif相互重叠，而nef与env不重叠；BHIV-Ⅱ的vpr与vif不重叠，而nef与env相互重叠。（3）结构基因表达产物HIV-ⅠHIV-Ⅱ包膜蛋白基因env：gp160gp120gp41gp140gp105gp36群抗原基因gag：p55p24p18p56

8、p26p16多聚酶基因pol：p65p51p31p68p53p34HIV感染机理HIV病毒侵入人体后，其表面糖蛋白gp120与细胞表面受体蛋白CD4以高亲和力结合，吸附到宿主细胞上；gp120再与宿主细胞表面辅助受体相互作用，使病毒与宿主细胞膜更接近；gp41产