艾滋病、梅毒、乙肝实验室检测技术

《艾滋病、梅毒、乙肝实验室检测技术》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、....艾滋病、梅毒、乙肝实验室检测技术岳阳市疾控中心白志永艾滋病抗体检测及样品保存、运送一、HIV抗体检测筛查方法酶联免疫吸附试验（ELISA）化学发光或免疫荧光试验快速检测（RT）（建议配备合格的快速检测试剂，灰区。）二、筛查程序初筛和复检流程（图1）样品初筛试验筛查试剂阳性反应阴性反应复检试验原有试剂+另一不同原理（或厂家）试剂或另外两种不同原理（或厂家）试剂均阳性反应一阴一阳均阴性反应确证试验报告阴性图1HIV抗体筛查检测流程三、筛查试验结果的报告（建议用修改后报告单附表3）（例）HIV抗体筛查试验用附表1、2进行报告，阴性反应报告为

2、“HIV抗体阴性（-）”；阳性反应报告为“HIV抗体待复检”。学习参考....四、HIV感染产妇所生儿童HIV抗体检测策略及流程1、适用范围HIV感染产妇所生婴幼儿；已满18个月的婴幼儿，其母亲HIV感染状态不详，儿童出现HIV相关临床表现，临床怀疑HIV感染的儿童。2、检测程序五、样品的保存、运送1、样品的保存用于抗体和抗原检测的血清或血浆样品，短期（1周）内进行检测的可存放于2～8℃，一周以上应存放于-20℃以下。2、样品的运送（例）（1）应符合生物安全要求；(2)应采用三层容器对样品进行包装。学习参考....第一层容器：直接装样品，应防

3、渗漏。样品应置于带盖的试管内。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。第二层容器：容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。要求不易破碎、带盖、防渗漏、容器的材料要易于消毒处理。第三层容器：容纳并保护第二层容器的运输用外层包装箱。外面要贴上醒目的标签、联系方式，还应易于消毒。(3)用于抗体检测的血清和血浆样品应在冻存条件下运送。质量控制一、艾滋病抗体检测的统计学室内质量控制1、试剂盒内部对照即试剂盒提供的阳性和阴性对照血清。用于判断实验的有效性，不能作为室内质控品使用，内部对照结果无效，必须重新试验。2、室内质控品为非试剂盒组份的外部质

4、控品，是为了监控检测的重复性而设置的，包括强阳性、弱阳性和阴性质控血清。也可以只设置一个弱阳性质控，以该试剂盒临界值（Cut-off）的2～3倍为宜。作用：判断该批临床样品检测的有效性，每次实验必须包含室内质控品，其结果无效，必须重新试验。学习参考....二、统计室内质控的主要表示方法—建立质控图最常用的质控图是Levey-Jennings利维詹宁斯质控图，下面以ELISA方法检测HIV抗体为例，描述建立质控图步骤：1、建立质控图参数一般采用在不同批次检测取得至少20个数据，以建立一个临时性的均值和标准差a、算术平均值（）：Σx=──nb、标

5、准差（s）：是描述样品与均数之间离散程度的一个指标s计算公式为：───────∑（xn-）2s=───────n-1c、变异系数（cv）：scv=──-×100%2、绘制质控图（a）在常规条件下，对同一批血清连续测定20次（天）或以上，获得一组S/CO值，求均数（）和标准差（s）,超出2s或3s的数据不应删除。（b）将均值（）和标准差（s）分别在质控框架图中标示出来。以S/CO值作纵座标（Y轴），每一批次试验作横座标（x轴），绘制质控图。（c）从第21次起，将每次质控血清的检测结果依次点入该质控框架图中，检验进入质控状态。学习参考....3、

6、质控规则及其使用质控规则的使用应检出随机误差和系统误差，目前有许多质控规则，常用的是12S和13S规则。（a）告警（12S）：当外部质控品的S/CO值超出+2s范围时，系统处于告警状态，应予注意，是否可以继续检测需要进一步观察。若将12S做失控标准，有较高的假失控概率，所以一般不采用。（b）失控（13S）：当外部质控品的S/CO值超出+3s范围时，系统处于失控状态，本次实验结果不能被接受，可能是系统误差、随机误差或外部质控品稳定性下降所致。（c）漂移：连续几次（3～5次）外部质控品的S/CO值都落在均值的一侧则称为漂移，提示实验条件发生了较大

7、的变化。（d）趋势：连续几次（5～7次）外部质控品的S/CO值几乎按一个方向分布时称为趋势，通常由参数的缓慢改变引起。艾滋病实验室生物安全一、HIV的生物危害第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。人类免疫缺陷病毒（HIV）属第二类病原微生物，是高致病性病原微生物。二、HIV相关检测的生物安全级别HIV抗体检测应在符合Ⅱ级生物安全实验室（BSL-2）要求的艾滋病检测实验室中进行。三、生物安全保证措施1、建立安全制度艾滋病检测实验室应建立下列安全制度(1)实验室的安全工作制度或安全标准操作程序（S-SOP）。(2)意外事故处理预案，主

8、要是生物安全意外事故。(3)信息安全及保密制度：（例）2、培训和管理3、个人保健和防护4、安全操作5、实验室的清洁和消毒工作完毕应对工作台面消毒，推荐用0.1～0.