第二節、分子生物學常用研究技術 - 歡迎進入網絡教學綜合平臺

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1、分子生物学实验指导第一节、实验室规则及安全防护一、实验室规则二、实验室安全防护第二节、分子生物学常用研究技术一、核酸分离纯化二、聚合酶链反应技术三、分子杂交技术四、分子克隆技术五、其它新技术第三节、常用仪器使用一、离心机二、分光光度计三、PCR仪第四节、如何撰写实验报告第五节核酸分离纯化技术实验一、基因组DNA的提取制备与检测实验二、总RNA的提取制备与检测实验三、质粒DNA的提取制备与检测第六节PCR技术实验四、常规PCR技术实验五、定量PCR技术第七节分子克隆技术实验六、DNA的限制性酶切与电泳实验七、凝胶中DNA片断的纯化回收实验八、DNA连接实验实验九、感受

2、态细胞的制备实验十、重组DNA转化与篮白斑筛选第八节分子杂交技术实验十一、Southern印迹杂交实验十二、Northern印迹杂交实验十三、Western印迹实验十四、核酸原位杂交第九节综合性实验实验十五、蛋白质双向电泳实验十六、酵母双杂交实验实验十七、RNA干扰实验第一节、实验室规则及安全防护一、实验室规则1．每个同学都应该自觉遵守课堂纪律，维护课堂秩序，不迟到，不早退，不大声谈笑。2．实验前认真预习实验内容，熟悉本次实验的目的，基本原理，操作步骤，懂得每一步操作的意义和了解所用仪器的使用方法，否则不能开始实验。3．实验时要听从指导老师的指导，严格认真地按规程进

3、行实验，并注意与同组同学的配合。未经许可，不得乱动实验装置、仪器以及电器设备等。4．实验数据和现象应随时记录在专用的实验记录本上。实验结束时，实验记录必须送指导老师审阅后方可离开实验室；实验报告应该当堂完成或在下次实验开始前交给指导老师。5．保持台面、地面、水槽内及室内整洁。精心爱护各种仪器，要随时保持仪器的清洁。如发生故障，应立即停止使用并报告指导老师。完成实验后应将器材洗净，把器材、药品归放回原处，试管倒置于试管架中并排列整齐。按规定处理好废物，废液，做好清洁卫生。器材、仪器如有损坏须立即报告指导老师并按学校规定进行适当比例赔偿。6．按需要量取药品及蒸馏水等各种

4、物品，注意节约。7．公用仪器，药品用后放回原处。多取的药品不得重新倒入原试剂瓶内。公用试剂瓶的瓶塞要随开随盖，不得混淆，更不能互相污染。严禁用口吸或用皮肤接触有毒药品与试剂。8．需交指导老师保存的样品，药品及其他物品都应加盖，并标注自己的姓名，班级，日期及内容物。9．废液体可倒入水槽内，同时放水冲走。含强酸，碱及有毒废液应倒入废液缸。废纸屑及其它固体废物和带渣滓的废物倒入废品篓或废品缸中，不能倒入水槽或到处乱扔。书包及实验不需之物品放在规定处。10．实验室内严禁吸烟！不得将含易燃溶剂的溶液近火。对电炉等火源，严格做到：人在火在，人走火灭。乙醇、丙酮、乙醚等易燃品不能

5、直接加热，并要远离火源操作和放置。实验完毕，应立即拔去电炉插头和关好水龙头，拉下电闸。漏电的设备一律不得使用。离开实验室前应该检查水、电、窗等是否关好。11．实验室内一切物品，未经教师批准，严禁带出室外。12．每次实验课由班长或课代表负责安排值日生。值日生的职责是负责当天实验室的卫生、安全和其它服务性工作。二、实验室安全防护实验室是学校教学的重要科学基地，贮存有贵重的仪器和化学危险药品等。为防止损失和产生事故，必须做好防盗、防火、防水、防毒和安全用电等工作。（一）防盗1．加强防卫，经常检查，堵塞漏洞。2．非工作人员不得进入仪器室，室内无人时随即关好门窗。3．仪器室内

6、不会客，不住宿，未经领导同意，谢绝参观。4．发生盗窃案件时，保护好现场，及时向领导、治安部门报告。（二）防火、防爆1．严禁在仪器室内生火取暖。2．易燃、易爆的化学药品要妥善分开保管，应按药品的性能，分别做好贮藏工作，注意安全。3．做化学实验时要严格按照操作规程进行，谨防失火、爆炸等事故发生。（三）防水1．实验室的上、下水道必须保持通畅。2．冬季做好水管的保暖和放空工作，要防止水管受冻爆裂酿成水患。（四）防毒1．实验室必须做好防毒工作，有毒物质应妥善保管和贮藏，实验后的有毒残液要妥善处理。2．凡易燃、易毒、腐蚀剂等危险性药品要设专柜单独存放。要定期检查，严格管理，做到

7、双人管理、双人收发、双人领取、双人记帐、双人把锁。3．实验中严格遵守操作规程，制作有毒气体要在通风橱内进行，保持实验室内通风良好。4．化学实验室备有废液缸，实验室附近有废液处理池，防止有毒物质随意排放。（五）安全用电1．实验室电路及用电设施要定期检修，保证安全，决不“带病”工作。2．如有电器失火，应立即切断电源，用沙子或灭火器扑灭。在未切断电源前，切忌用水或泡沫灭火机灭火。3．遇有人身触电事故，应立即切断电源，及时进入人工呼吸，急送医院救治。第二节、分子生物学常用研究技术一、核酸分离纯化核酸分子是分子生物学技术所涉及的主要对象，核酸分离纯化的质量好坏直接关系到后