毕业论文（设计）--双水相萃取技术分离菠萝酶的工艺研究

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1、青岛农业大学毕业论文（设计）题目：双水相萃取菠萝蛋白酶的工艺研究姓名：周艳琴学院：食品科学与工程专业：生物工程班级：200702学号：20074309指导教师：谭海刚2011年6月5日目录摘要IAbstractII1引言11.1双水相萃取分离技术21.2双水相形成机理21.3影响物质分配平衡的因素21.4菠萝蛋白酶在PEG/(NH4)2SO4双水相体系中的萃取原理31.5论文研究的主要内容32材料与方法52.1实验材料52.1.1、材料52.1.2设备52.2实验方法52.2.1双水相体系的确定

2、52.2.2相图的绘制52.2.3蛋白标准曲线的绘制72.2.4菠萝粗酶的提取82.2.5PEG/(NH4)2SO4双水相体系的建立82.2.6双水相萃取操作方法82.2.7菠萝蛋白酶酶活测定-G.D.U法93结果与分析103.1每g菠萝下脚料中含有的菠萝蛋白酶含量及菠萝蛋白酶的活性103.2不同分子量的PEG/(NH4)2SO4体系相图的制作103.3PEG的分子量对菠萝蛋白酶的分配系数、相比及酶活回收率的影响133.4PEG浓度对菠萝蛋白酶的分配系数、相比及酶活回收率的影响143.5(NH4

3、)2SO4浓度对菠萝蛋白酶的分配系数、相比及酶活回收率的影响153.6外加盐NaCl浓度的不同对菠萝蛋白酶的分配系数、相比及酶活回收率的影响164讨论17参考文献18致谢19青岛农业大学学士学位论文双水相萃取菠萝蛋白酶的工艺研究双水相萃取菠萝蛋白酶的工艺研究生物工程专业周艳琴指导教师谭海刚摘要：菠萝蛋白酶是典型的巯基蛋白酶，能分解蛋白质、肽、酯、酰胺，应用范围极广，而双水相萃取技术与传统的萃取技术相比具有操作条件温和、处理量大、易于连续操作等优点，从而使其广泛应用于生物分离工程中。本文研究了不同

4、PEG分子量、PEG浓度、(NH4)2SO4质量分数以及外加盐等因素对菠萝蛋白酶酶活回收率、分配系数及相比的影响。实验结果表明：PEG平均分子量1000，浓度15%，(NH4)2SO4浓度14%，pH为7.0，室温的情况下，其分配系数达到3.30，酶活性回收率可达92.14%，相比为3.54。当加入一定浓度NaCl不利于菠萝蛋白酶进入PEG相，对菠萝蛋白酶活性有一定影响，而加入MgCl2和CaCl2明显使菠萝蛋白酶活性降低。关键词：双水相；聚乙二醇；菠萝酶；萃取19青岛农业大学学士学位论文双水相

5、萃取菠萝蛋白酶的工艺研究Studyontheextractionofbromelainbyaqueoustwo-phasesystemStudentmajoringinBioengineeringZhouYanqinTutorTanHaigangAbstract：Bromelainwastheacysteineproteinaseenzymewhichhadthemosttypicalandaverywiderangeofapplication.Itcoulddecomposeprotein,p

6、eptide,ester,amide.Aqueoustwo-phaseextraction(ATPE)wasanewtechnologywhichhadtheadvantageofmildoperationstate,largecapacity,continuousprocessesovertraditionalextractioninbiologicalseparation.soitcouldbewildlyusedinbio-separationengineering.Theeffectso

7、faqueoustwo-phasesystemandtheproportionintophasecomposition,operatingconditions,dilutingratioonbromelainactivitywerestudiedduringthispaper.InPEG/(NH4)2SO4two-phaseaqueoussystem,theeffectsofthemolecularweightofthePEGused,theconcentrationsofPEGandthema

8、ssfractionofPEG/(NH4)2SO4andotherfactorsoutsidethesaltdistributecoefficientofbromelainandtherecoveryofenzymeactivity.Experimentsshowedthat,averagemolecularweightofPEG1000,concentrationof15%,(NH4)2SO4concentrationof14%,pH7.0,thecaseofroomtemperature,t