双水相萃取菠萝蛋白酶的工艺研究 毕业论文

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1、毕业论文(设计)题目:双水相萃取菠萝蛋白酶的工艺研究姓名:学院:食品科学与工程专业:生物工程班级:200702学号:指导教师:2011年6月5日目录摘要IAbstractII1引言11.1双水相萃取分离技术21.2双水相形成机理21.3影响物质分配平衡的因素21.4菠萝蛋白酶在PEG/(NH4)2SO4双水相体系中的萃取原理31.5论文研究的主要内容32材料与方法52.1实验材料52.1.1材料52.1.2设备52.2实验方法52.2.1双水相体系的确定52.2.2相图的绘制52.2.3蛋白标准曲线的绘制72.2.4菠萝粗酶的提取82.2.5PEG/(NH4)2SO4双水相体系的建立82

2、.2.6双水相萃取操作方法82.2.7菠萝蛋白酶酶活测定-G.D.U法93结果与分析103.1每g菠萝下脚料中含有的菠萝蛋白酶含量及菠萝蛋白酶的活性103.2不同分子量的PEG/(NH4)2SO4体系相图的制作103.3PEG的分子量对菠萝蛋白酶的分配系数、相比及酶活回收率的影响133.4PEG浓度对菠萝蛋白酶的分配系数、相比及酶活回收率的影响143.5(NH4)2SO4浓度对菠萝蛋白酶的分配系数、相比及酶活回收率的影响153.6外加盐NaCl浓度的不同对菠萝蛋白酶的分配系数、相比及酶活回收率的影响164讨论17参考文献18致谢19双水相萃取菠萝蛋白酶的工艺研究摘要:菠萝蛋白酶是典型的巯

3、基蛋白酶,能分解蛋白质、肽、酯、酰胺,应用范围极广,而双水相萃取技术与传统的萃取技术相比具有操作条件温和、处理量大、易于连续操作等优点,从而使其广泛应用于生物分离工程中。本文研究了不同PEG分子量、PEG浓度、(NH4)2SO4质量分数以及外加盐等因素对菠萝蛋白酶酶活回收率、分配系数及相比的影响。实验结果表明:PEG平均分子量1000,浓度15%,(NH4)2SO4浓度14%,pH为7.0,室温的情况下,其分配系数达到3.30,酶活性回收率可达92.14%,相比为3.54。当加入一定浓度NaCl不利于菠萝蛋白酶进入PEG相,对菠萝蛋白酶活性有一定影响,而加入MgCl2和CaCl2明显使菠

4、萝蛋白酶活性降低。关键词:双水相;聚乙二醇;菠萝酶;萃取Studyontheextractionofbromelainbyaqueoustwo-phasesystem18Abstract:Bromelainwastheacysteineproteinaseenzymewhichhadthemosttypicalandaverywiderangeofapplication.Itcoulddecomposeprotein,peptide,ester,amide.Aqueoustwo-phaseextraction(ATPE)wasanewtechnologywhichhadtheadvant

5、ageofmildoperationstate,largecapacity,continuousprocessesovertraditionalextractioninbiologicalseparation.soitcouldbewildlyusedinbio-separationengineering.Theeffectsofaqueoustwo-phasesystemandtheproportionintophasecomposition,operatingconditions,dilutingratioonbromelainactivitywerestudiedduringthi

6、spaper.InPEG/(NH4)2SO4two-phaseaqueoussystem,theeffectsofthemolecularweightofthePEGused,theconcentrationsofPEGandthemassfractionofPEG/(NH4)2SO4andotherfactorsoutsidethesaltdistributecoefficientofbromelainandtherecoveryofenzymeactivity.Experimentsshowedthat,averagemolecularweightofPEG1000,concentr

7、ationof15%,(NH4)2SO4concentrationof14%,pH7.0,thecaseofroomtemperature,thedistributioncoefficientof3.30,upto92.14%activityrecovery,foraddingacertainconcentrationofNaClhadlittleeffectontheactivityofbromelain,MgCl2andCaCl

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