丙泊酚及右美托咪定对体外培养海马神经元的影响及机制研究

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1、授予单位代码10089学号或申请号20122186H妗(£钭大§HebeiMedicalUniversity硕士学位论文科学学位丙泊酚及右美托咪定对体外培养海马神经元的影响及机制研究研究生：张馥镇导师：康荣田教授专业：麻醉学二级学院：第二医院2015年3月河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师（或指导小组）的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单

2、位河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应法律责任。�.f广‘•*•广•/.研究生签名:张絲货导师签章:二级学院领导盖f丨河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人己经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名导师签章：年芩月《日目录中文摘要.........................................

3、.............................................................1英文摘要………………………………………………………………......4英文缩写……………………………………………………………….....9研究论文丙泊酚及右美托咪定对体外培养乳鼠海马神经元的影响及机制研究引言………………………………………………………………….10第一部分原代乳鼠海马神经元的培养、形态学观察及纯度鉴定前言………………………………………………………………….11材料与方法………

4、………………………………………………….11结果………...………………………………………………………..15附图...........…………………………………………………………..17讨论……………………………………………………………….....19小结………………………………………………………………...19参考文献…………………………………………………………...20第二部分丙泊酚及右美托咪定对发育期海马神经元突起及突触的影响前言………...………………………………………………………..22材料与方法……

5、…………………………………………………….22结果………...………………………………………………………..24附表………………………………………………………………….26讨论……………………………………………………………….....27小结………………………………………………………………….28参考文献…………………………………………………………..28第三部分丙泊酚及右美托咪定对发育期海马神经元影响的可能机制材料与方法………………………………………………………….30结果………...…………………………………

6、…………………….34附图...........…………………………………………………………..35附表…………………………………………………………………36讨论………………………………………………………………....37小结………………………………………………………………….38参考文献…………………………………………………………....39结论………………………………………………………………….…….40综述右美托咪定通过星形胶质细胞起的神经保护作用的研究……41致谢………………………………………………………

7、………………..49个人简历…………………………………………………………………..50中文摘要丙泊酚及右美托咪定对体外培养乳鼠海马神经元的影响及机制研究摘要第一部分原代乳鼠海马神经元的培养、形态学观察及纯度鉴定目的：1培养新生SD乳鼠海马神经元，掌握大鼠海马神经元的体外培养技术；2观察不同阶段的原代海马神经元的形态学特点；3利用免疫荧光细胞化学方法鉴定神经元纯度。方法：取新生24h内的SD乳鼠，用碘酊和75%乙醇消毒，剪断头，分层剪开皮肤和颅骨，用弯镊取出大脑，置于预冷的DMEM液中，快速剥离出两侧海马组织，在解

8、剖显微镜下去除海马的血管和被膜，把海马移入含有木瓜酶的DMEM中，置于37°C，5%CO2培养箱中消化30min。用吸管将组织块移入含有10%血清的DMEM液中终止消化2min。然后把组织块移入含有血清的DMEM液中，用维纳斯剪剪碎，用枪头轻轻吹打三到五次，然后过200目细胞筛。取0.9ml按台盼蓝拒染6法进行活细胞计数，制成1×10/ml密度的细胞悬液,种植于Matri