七氟烷预处理对窒息新生鼠海马ca1区神经元自噬及远期认知功能的影响

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1、分类号:R614学校代码:10392学科专业代码:100217学号:2121003242硕士学位论文七氟烷预处理对窒息新生鼠海马CA1区神经元自噬及远期认知功能的影响EffectofsevofluranepreconditioningonhippocampalCA1regionneuronsautophagyandlong-termcognitivefunctioninnewbornratwithasphyxia学位类型:医学硕士所在学院:协和临床医学院申请人姓名:李吹雨学科、专业:麻醉学导师:张良成教授研究起止日期:2013年12月至2015年1月

2、答辩委员会主席:林财珠教授答辩日期:2015年6月1日二○一五年福建医科大学硕士学位论文目录中文摘要.................................................1英文摘要.................................................3前言.....................................................7第一部分新生鼠窒息模型的建立...........................10材料.......................

3、.............................10方法....................................................12结果....................................................15讨论....................................................20第二部分七氟烷预处理对窒息新生鼠海马CA1区神经元自噬及远期认知功能的影响..........................................

4、21材料....................................................21方法....................................................24结果....................................................30讨论....................................................44结论..................................................

5、..48福建医科大学硕士学位论文参考文献................................................49综述....................................................57参考文献................................................63致谢....................................................67福建医科大学硕士学位论文七氟烷预处理对窒息新生鼠海马CA1区神经元自噬及远期认知功能

6、的影响中文摘要目的:模拟出生窒息,建立新生大鼠窒息模型,研究新生大鼠窒息模型的可行性,并观察七氟烷预处理对窒息新生大鼠海马CA1区神经元自噬和远期认知功能的影响,探讨七氟烷预处理可能的脑保护作用和机制。方法:1、参考Grojean和余加林等人的方法,将7日龄(P7)的SD大鼠持续呼吸100%氮气10min,建立新生大鼠窒息模型,并通过神经行为学观察、动脉血气分析、短期神经功能评价、脑水肿的测定以及光镜下的形态学鉴定。2、将282只7日龄大鼠随机分成对照组(C组),缺氧组(H组),七氟烷预处理组(S组),采用免疫组化、westernblot检测自噬相关

7、蛋白LC3的变化;HE染色和DAPI染色观察海马CA1区神经元的病理变化;P21行悬吊实验,P23行平衡木实验,P28—P33行水迷宫实验。结果:1、7日龄大鼠持续呼吸100%氮气10min作为造模缺氧时间,缺氧过程中大鼠皮肤紫绀,异常烦躁、肢体抽动、昏迷,二便失禁等异常的神经行为学表现。大鼠随缺氧时间延长SPO2下降,酸中毒,动脉血氧分压降低和二氧化碳分压升高。与正常组相比,模型组脑含水量升高(P<0.05)。与正常组相比,模型组完成趋地反射和悬崖逃避反射时间较长(P<0.05)。苏木精素-伊红染色显示模型组大鼠皮质和海马神经元严重损伤。2、HE染

8、色显示C组海马CA1区形态、细胞结构正常;H组海马CA1区结构明显异常,细胞排列紊乱,成片神经元细胞核固缩;

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