卡特兰花色基因克隆、表达分析及花色素成分分析

《卡特兰花色基因克隆、表达分析及花色素成分分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号S682密级公开UDC学位论文卡特兰花色基因克隆、表达分析及花色素成分分析IsolationandExpressionofFloralColorGenesinCattleyaandTheirAnthocyaninsComposition王紫珊指导教师姓名王雁申请学位级别硕士专业学位专业名称风景园林研究方向园林植物应用论文提交日期2015年5月论文答辩日期2015年6月学位授予日期2015年7月答辩委员会主席孙振元评阅人北京·中国林业科学研究院学位论文卡特兰花色基因克隆、表达分析及花色素成分分析学位论文作者王紫珊指导教师姓名王雁申请学位级别硕士专业名称风景园林研究方向园林植物应用论文答辩日

2、期2015年6月15日中国·北京DissertationfortheDegreeIsolationandExpressionofFloralColorGenesinCattleyaandTheirAnthocyaninsCompostionCandidate:WangZishanSupervisor:WangYanAcademicDegreeAppliedfor:MasterofProfessionalDegreeSpeciality:LandscapeArchitectureDateofDefence:15thJune，2015Degree-conferring-institution:Ch

3、ineseAcademyofForestry独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得本研究生培养单位或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同王作的同志对本研巧所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：曰期；ｙ？）ｉｒ年＾月曰学位论文版权使用授权书本学位论义作者完全了解中国林业科学研究院有关保留、使用学位论文的规定，中国林业科学研究院有权保留并向国家有关部口或机构送交论文

4、的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权中国林业科学研究院可Ｗ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）＾从学位论文作者签名；禾《册导师签名：‘戸＇年＂７０Ｕ年备月曰０＾０（月曰若（５摘要卡特兰（CattleyaAlliance）为多年生草本附生植物，原产于中南美洲，是兰科观花植物中的珍品。尽管卡特兰的栽培史在欧美已接近200年，但有关卡特兰花色形成的分子机理及花色化学的研究仍未见报道。本研究以卡特兰紫色花品种‘PinkLady’（Cattleyahyb

5、rid‘PinkLady’）蕾期第三期的花瓣为材料，分离克隆出两个花色素合成途径中的关键基因，并对这两个基因进行生物信息学分析。利用相对实时荧光定量的方法分析了‘PinkLady’花瓣不同发育时期的表达模式，并分析盛开期时‘PinkLady’、‘Suzie’（Cattleyahybrid‘Suzie’）两种品种不同花器官部位的表达模式，这为卡特兰花色分子生物学及基因工程提供了理论基础。同时，利用高效液相色谱质谱联用技术对‘PinkLady’盛开期时各个花器官部位的花青素、黄酮及黄酮醇的成分进行结构分析，为卡特兰花色化学提供了理论依据。主要研究内容如下：1.采用RT-PCR和RACE相结合的方法

6、，首次从卡特兰花瓣中分离得到了一个查尔酮合酶（chalconesynthase,CHS）基因和一个二氢黄酮醇4-还原酶（dihydroflavonol4-reductase,DFR）基因的cDNA全长，分别命名为ChCHS1和ChDFR1，GenBank登录号分别为KP171693和KP171694。序列分析发现，ChCHS1的cDNA全长1508bp，编码394个氨基酸；ChDFR1基因的cDNA全长1250bp，编码350个氨基酸。同源性检索和生物信息学分析表明这两个基因编码的蛋白都具有各自的功能位点和保守性特征多肽序列。氨基酸序列比对与系统进化树分析显示，ChCHS1与ChDFR1基因在

7、兰科中与蕙兰、石斛兰关系最近，与百合科关系较近。2.将卡特兰‘Pinklady’的花瓣分为五个不同发育阶段，P1（花芽1.5cm长）、P2（花芽2.5cm长）、P3（花芽4cm长）、P4（花芽5cm长，即将开放）及P5（盛开期），以这五个发育阶段的花瓣为模板用相对实时荧光定量PCR的方法分析ChCHS1与ChDFR1基因的表达模式，结果表明，ChCHS1和ChDFR1都在蕾期（P1～P3）时表达量