二维和三维培养小鼠admscs成心肌分化的效果比较

二维和三维培养小鼠admscs成心肌分化的效果比较

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1、単位代码:10472学术学位口专业学位0学号:1235001:民322.1中图分类号密级:公开k新I咨i硕±学位论文二维和三维培养小鼠ADMSCs成心肌分化的效果比较EffectComparisonofmyocardialdiferentiation化rADMSCsin2dand3dcultivation作者姓名;常丹阳导师姓名;郭志坤教授刘玲玲教授学科口类;临床医学专业名称:内科学培养院系:新乡市中也医院—完成时间:二〇五年四月EffectComparisonofmyocardialdifferen

2、tiationforADMSCsin2dand3dc山tiva村onconditionsAThesisSubmittedfor也eDereeofMastergCandidate:ChangDanyangSuervisor:Prof.M.D.GuoZhikunpProtLiuLinHnggSchoolofBasicMedicalScienceXinxiangMedicalUniversity新乡医学院学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成

3、果。除了文中特别加W标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均己在文中明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名:則目曰期;■^年月/曰学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部口或机构送巧论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权新乡医学院可y?将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可W采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。""本学位论文属于(谭在^兰下相应

4、方框内打V):1□.保密,在年解密后适用本授权书。__2.不保密d/。■烤如口'/作者签名:曰期:知j年抑曰导师签名日期;2口中年y月1日目录摘要1Abstract3前言7材料与方法8淵20猶33小结37参考鏡39综述:脂肪间充质干细胞体外构建也肌组织的研究进展44附录60攻读学位期间发表文章情况61mM62个入简历63新乡医学院硕±学位论文二维和王维培养小鼠ADMSCs成心肌分化的效果比较摘要、也脏组织工程为也脏疾病后也肌细胞的修复和背景屯肌细胞的再生能力有限,

5、目前再生带来了新的治疗策略。在可移植的种子细胞中,脂肪间充质干细胞(AdiposeMesenchymalStemCells,ADMSCs)因其来源广泛、取材方便,伦理限制较少,已一成为也肌组织工程理想的种子细胞之。Atelocollagen胶原具有良好的生物相容性、,可被制成H维立体支架可降解性和可塑性,用作组织填充物和细胞培养支架。目前尚不知道ADMSCs是否可W在Atelocollagen支架上被培养成H维必趴。本研究试图把诱导必肌化的ADMSCs种植在支架上,体外培养成立体也肌。目的探讨小鼠ADMSCs在二维和H维培养条件下,利用不同诱导方法,评价诱导

6、、ADMSC?成屯肌分化的效果,y及判断H维培养后的s在私脏内的存活情况,为也肌组织工程提供实验参考。方法1.取小鼠腹股沟皮下脂肪组织,分离培养ADMSCs,传至第3代后,用C悦9+、CD45-ADMSCs标记,流式细胞仪分选。2.使用成脂、成骨诱导培养基诱导ADMSCs,对成骨诱导组行茜素红染色,对:成脂诱导组进行油红0染色,检测其多向分化潜能。3-ADMSC.分别利用5aza和将s注射也肌组织内,诱导ADMSCs定向也肌分化,用免疫巧光技术检测也、肌特异性标记cTnT的表达情况。4.用DAPI、PKH26、GFP分别标记ADMSCs后种植在Atel

7、ocollagen胶原支架上进行H维培养,观察计算不同方法的标记率。5MSCs5-aza和在大鼠必肌组织.将AD种植于H维支架上分别经内的微环境诱、导,,在不同时间点观察支架上的ADMSCs向屯肌分化的情况用免疫巧光技术检测e也肌特异性标记cTnT的表达。观察Atlocollagen胶原支架在也肌内降解时间,检测支架内ADMSCs缝隙连接蛋白Cx43的表达,分析移植的细胞与宿主也肌细胞是否发1

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