dh对家蚕mf不滞育机理研究

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1、学校代码：10289分类号：Q3密级：公开学号：122310008江苏科技大学硕士学位论文DH对家蚕MF不滞育机理研究研究生姓名何庆玲导师姓名徐安英钱荷英申请学位类别理学硕士学位授予单位江苏科技大学学科专业遗传学论文提交日期2015年4月27日研究方向家蚕育种及分子生物学论文答辩日期2015年6月3日答辩委员会主席赵巧玲评阅人2015年6月3日分类号：Q3密级：公开学号：122310008理学硕士学位论文DH对家蚕MF不滞育机理研究学生姓名何庆玲指导教师徐安英研究员钱荷英副研究员江苏科技大学二O一五年六月AThesisSubmittedinFulfillmentofthe

2、RequirementsfortheDegreeofMasterofScienceStudyonthemechanismofsilkwormstrainMFcannotlaydiapauseeggswithinjectingDHSubmittedbyHeQinglingSupervisedbyProfessorXuAnyingAssociateProfessorQianHeyingJiangsuUniversityofScienceandTechnologyJun,2015江苏科技大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作

3、所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并表示谢意。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：江苏科技大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权江苏科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于：(1)保密□，在年解

4、密后适用本授权书。(2)不保密。学位论文作者签名：指导教师签名：年月日年月日摘要摘要养蚕业是中国农业的重要组成部分，尤其是在西部地区，对增加农民收入起着重要作用，近几年桑蚕业的综合利用也得到了较大发展。作为蚕丝业的主角-家蚕，其生长发育过程所体现的化性，眠性以及其他的生活习性和优质蚕茧的生产，优质蚕种的制造以及蚕种的保护都息息相关。如何对我们种质资源进行合理的开发、利用与保存至关重要，本实验室在探寻无滞育多化性品种冬季保存方法的过程中发现，大多数无滞育多化性品种可通过体外注射滞育激素使其产下滞育卵从而解决冬季保存难的难题。但其中一个无滞育多化性品种MF注射滞育激素后依然

5、不能产下滞育卵，是一个非常有趣和特殊的现象。本研究以此特殊现象为出发点，基于家蚕滞育激素调控的滞育信号通路，对该特殊素材的滞育激素基因和滞育激素受体基因进行克隆和结构分析，并对不同化性品种家蚕在蛹期和幼虫期的滞育激素基因和滞育激素受体基因进行表达模式分析，同时对相关候选基因进行RNA干涉来探究其功能，这为完善家蚕滞育基因调控网格，解析家蚕滞育机理提供一定的理论基础，同时也为农业生产中害虫防治起到积极的借鉴作用。主要研究结果如下：1、家蚕MF品种DH基因的克隆及不同化性品种DH基因的表达模式分析为探究给家蚕多化性品种MF的蛹体注射滞育激素仍无法诱导其产下滞育卵的原因,从该品

6、种5龄第3天幼虫头部组织克隆了滞育激素基因（DH）的全长cDNA，其中包含44bp的5′端非编码区和173bp的3′端非编码区，以及一个大小564bp的ORF，编码187个氨基酸残基，克隆的该基因片段命名为BmDH-MF。BLAST比对显示，克隆的滞育激素基因编码氨基酸与NCBI数据库中来自家蚕二化性品种大造的滞育激素基因（BAA059713）编码氨基酸的序列相似度为90.1%。运用半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR技术检测滞育激素基因在3个不同化性家蚕品种蛹期头部和卵巢以及家蚕品种MF5龄期雌、雄幼虫不同组织中的转录表达水平，结果显示：该基因mRNA在家蚕品种MF雌

7、、雄幼虫的头部、血液、生殖腺3个组织中有转录，中肠、丝腺、马氏管、表皮、脂肪体5个组织中没有检测到转录；该基因在不同化性家蚕品种蛹期头部和卵巢的转录水平存在差异，转录量从高到低依次为二化性家蚕品种C108，多化性品种MF、尼斯塔里。2、家蚕MF品种DHR基因克隆及不同化性品种DHR基因的表达模式分析从滞育激素信号接受器—滞育激素受体（DHR)入手，从该家蚕MF品种中克隆了DHR基因的全长cDNA，序列分析表明：该基因序列全长2204bp，包括371bpI江苏科技大学理学硕士学位论文的5’端非翻译序列(5’-UTR)和370bp