结核杆菌脂质抗原对人外周血单个核细胞的作用

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1、安徽医科大学ANHUIMEDICALUNIVERSITY硕士学位论文论文题目结核杆菌脂质抗原对人外周血单个核细胞的作用MycobacteriumtuberculosisLipidseffectsonhumanperipheralMononuclearcells作者姓名金亮指导教师沙泉学科、专业免疫学研究方向感染免疫论文工作时间2013年04月至2015年03月2015年03月分类号：密级：UDC：编号：学位论文结核杆菌脂质抗原对人外周血单个核细胞的作用MycobacteriumtuberculosisLipidseffe

2、ctsonHumanPeripheralMononuclearcells金亮指导教师姓名沙泉教授安徽医科大学免疫教研室及过敏与免疫研究中心申请学位级别硕士专业名称免疫学提交论文日期2015-03论文答辩日期2015-05学位授予单位和日期安徽医科大学2015-06答辩委员会主席李柏青教授评阅人黄保军，沈继龙2015年03月目录中英文缩略词对照表..........……………………………………………….1中文摘要..........…………………………………………………………….4英文摘要..........…………………

3、………………………………………….61前言.......………………………………………………………………….82材料与方法.......………………………………………………………….92.1实验材料...……………………………………………………………92.1.1结核分枝杆菌抗原及其配制......…………………………………92.1.2实验标本的来源.............………………………………………102.1.3主要的试剂.....……………………………………………………92.1.4主要仪器和设备...…………………

4、……………………………102.1.5主要的试剂配制...………………………………………………122.2实验方法..…………………………………………………………142.2.1人AB型血清分离.......…………………………………………142.2.2人外周血（全血）PBMC分离.………………………………142.2.3人外周血白细胞浓缩液中PBMC分离...………………………142.2.4PBMC的冻存与复苏..…………………………………………152.2.5CFSE和PI染色方法.......………………………………………1

5、52.2.6两种血清对结核杆菌抗原培养的比较..........................................152.2.7单核细胞的分离和诱导培养..........………………………………162.2.8粘附细胞的培养前后检测以及ELISPOT检测IL-12的分泌..…162.2.9ELISA检测培养中的Ｔ淋巴细胞TNF-a含量…………………162.2.10培养后细胞增殖情况及其增殖亚群检测............………………172.2.11培养后细胞的细胞因子分泌情况的检测.........…………

6、………172.3统计学分析....………………………………………………………183结果......…………………………………………………………………183.1两种血清对结核杆菌抗原刺激人外周血细胞增殖的比较....……183.2粘附细胞分离和诱导成功的流式细胞仪结果.................…………213.3imDCs被多种抗原刺激后流失细胞仪检测成熟度.........................243.4多种抗原刺激imDCs后ELISPOT检测结果………………………253.5PBMC培养中的ELISA检

7、测结果.................……………………253.6抗原刺激扩增培养后T细胞亚群增值情况...................………….263.7抗原刺激扩增培养后T细胞分泌IFN-γ，IL-4，TNF-α的检测.......29讨论……………….………………………………………………………32结论......…………………………………………………………………34参考文献…………………………………………………………………35附录………………………………………………………………………37致谢…………………………

8、……………………………………………38综述及参考文献…………………………………………………………39安徽医科大学硕士学位论文中英文缩略词对照表英文缩略词英文全称中文名称M.tbMycobacteriumtuberculosis结核分枝杆菌TCRTcellreceptorT细胞受体MHCMajorhistocompat