秦川牛肌肉与脂肪组织发育相关mirna鉴定及mir-10020调控机制解析

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1、分类号：Q38:S813.1学校代码：10712UDC：575研究生学号：2010060143密级：公开级2015届攻读博士学位研究生学位（毕业）论文秦川牛肌肉与脂肪组织发育相关miRNA鉴定及miR-10020调控机制解析学科专业动物遗传学研究方向生物技术与家畜育种研究生孙加节指导教师陈宏教授完成时间2015年3月中国陕西杨凌Classificationcode:Q38:S813.1Universitycode:10712UDC:575Postgraduatenumber:2010060143Con

2、fidentialitylevel:UnclassifiedDissertationforDoctorDegreeNorthwestA＆FUniversityin2015IDENTIFICATIONOFMICRORNASFROMCHINESEQINCHUANBOVINEMUSCLEANDADIPOSETISSUESANDFUNCTIONALANALYSISOFMIR-10020DURINGMYOGENESISMajor:AnimalGeneticsResearchfield:Biotechnology

3、andAnimalBreedingNameofPostgraduate:JiajieSunAdviser:Prof.Dr.HongChenDateofsubmitted:March,2015YanglingShaanxiChina本研究由现代农业（肉牛）产业技术体系专项（CARS-38)国家自然科学基金项目：秦川牛肌肉发育相关miRNA鉴定与功能研究（31272408）陕西省农业科技创新项目：肉用家畜多基因聚合育种共性关键技术研究与应用（2012NKC01-13）资助完成研究生学位（毕业）论文的独创性

4、声明本人声明：所呈交的博士学位（毕业）论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究结果；论文中的研究数据及结杲的获得完全符合学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，如杲违反此规定，一切后杲与法律责任均由本人承担。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究结果，也不包含其他人和自己本人已获得西北农林科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文的致谢中作了明确的说明并表示了谢意。

5、导师指导研究生学位（毕业）论文的承诺本人承诺：我的博士研究生所呈交的博士学位（毕业）论文是在我指导下独立开展研究工作及取得的研究结杲，属于我现岗职务工作的结杲，并严格按照学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》而获得的研究结杲。如果违反学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，我必须接受按学校有关规定的处罚处理并承担相应导师连带责任。关于研究生学位（毕4)论文使用授权的说明本学位（毕业）献的知识产权归属西北农林科技大学。本人同意西北农林科技大学保存或向国家有关部门或机构

6、送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；同意西北农林科技大学将本学位（毕业）论文的全部或部分内容授权汇编录入《中国博士学位论文全文数据库》进行出版，并享受相关权益。本人保证，料《开U者讀憾）絲农林科技大雜，发表謎使用本学位（毕业）论文及其相关的工作成果时，必须以西北农林科技大学为第一署名单位，否则，按违#《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追冗法律责任。任何收存和保f本论文各雜他单位和个人浪括聰生本人)未经本论文作者的导师同意，不得有对本论文进行复制、修改、发行、出租、改编等侵犯著作权的

7、行为，否则，按违背《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追冗法律责任。(保密的学位论文在保密雜W，不得以任何方妓表、借阅、复印、缩印或扫描复制手段保存、汇编论文）研究生签名：时间年卜月f日秦川牛肌肉与脂肪组织发育相关miRNA鉴定及miR-10020调控机制解析摘要miRNAs是一类长度约为18～24nt的小分子单链非编码RNA，能够参与动物基因转录后表达调控，在动物生长、发育、激素分泌及疾病发生等生命活动中均起到极其重要的作用。牛肉优质高产是当前肉牛分子育种研究的重点和热点，牛肉高产主要涉及肉牛

8、肌肉组织发育，牛肉优质主要涉及肉牛脂肪组织发育。因此，本项目以秦川牛为研究对象，构建秦川牛背部肌肉组织及背部皮下脂肪组织不同发育阶段小RNA测序文库，筛选组织特异性和时序特异性表达miRNAs。然后利用实时定量PCR技术验证测序结果和进行组织表达谱分析，通过双荧光素酶报告基因试验确定重要功能miRNA的靶基因。进一步通过miRNA模拟物和抑制剂分别过表达或敲低重要功能miRNAs，研究其对牛肌卫星细胞增殖分化的影响，以便为秦川牛肉用选育提供新的理论依据及