肺炎克雷伯分离株耐药性和毒力基因的相关性研究

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1、SOOCHOWUNIVERSITY硕士专业学位论文论文题目肺炎克雷伯分离株耐药性和毒力基因的相关性研究研究生姓名______________李艳萌指导教师姓名__________________史进方专业名称临床检验诊断学研究方向微生物与分子生物学论文提交日期2015-5-6苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明••所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人

2、承担本声明的法律责任。论文作者签名s杳緣fej曰期2H一、苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即

3、学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所（含万方数据电子出版社)、中国学术期刊（光盘版）电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属在____年_月解密后适用本规定。非涉密论文口肺炎克雷

4、伯分离株耐药性和毒力基因的相关性研究中文摘要肺炎克雷伯分离株耐药性和毒力基因的相关性研究中文摘要目的：为了解肺炎克雷伯菌的耐药性和毒力基因的相关性，本研究通过对肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药性及毒力基因进行分析，了解其耐药谱和毒力基因分布，并分析两者间的相关性，为临床治疗提供理论基础。同时作同源性分析，分析肺炎克雷伯菌间的种系发生关系，为菌株的变异、分化、传播寻找规律。方法：通过收集119株肺炎克雷伯分离株，对其采用药敏纸片法分析耐药性，用PCR技术检测耐药基因SHV、TEM、CTX-M、OXA筛选肺炎克雷伯菌株中的ESBLs菌株，用PCR技术检测7种毒力基因rmpA、aer-1、aer-

5、2、magA、gyrb-2、ybt、wcaG，比较ESBLs肺炎克雷伯菌菌株与非ESBLs肺炎克雷伯菌菌株之间毒力基因分布率，分析多重耐药和毒力基因分布，并分析两者间的相关性。用BioEdit软件编辑序列，截成有相同数目位点的片段，用MEGA-4作聚类性和种系发生树进行同源性分析。结果：119株肺炎克雷伯分离株筛选耐药基因SHV、TEM、CTX-M、OXA检测出的阳性菌分别为18、20、26、6株，筛选出ESBLs肺炎克雷伯菌32株。119株肺炎克雷伯菌临床分离株进行多重耐药谱的分析，耐三种及以上抗菌药物的多重耐药率达可达41.17%，耐8-12种抗生素的菌株占得30.25%。119株肺

6、炎克雷伯临床分离株中不同毒力基因的检出率之间差异具有统计学意义（P<0.05）。119株肺炎克雷伯临床分离株中含有2种、3种、4种、5种不同毒力基因的菌株占有率相对较高，均在15%以上。对ESBLs与非ESBLs肺炎克雷伯菌菌株之间毒力基因分布率的比较，可明显看出ESBLs的肺炎克雷伯菌的毒力基因分布率较非ESBLs分布率低很多。对分离株的多重耐药率和毒力基因数进行相关性分析，毒力基因分布数与耐药性间的相关系数为-0.227(P<0.05)，呈负相关，具有显著性差异，表明毒力基因数与耐药性间有显著相关性；也就是说，毒力基因分布数越多的菌株，多重耐药现象出现的几率就越小。毒力基因分布数与耐

7、药基因数间的相关系数为-0.195(P<0.05)，呈负相关，具有显著性差异，表明毒力基因数与耐药基因数间有显著相关性；也就是说，毒力基因分布数越I中文摘要肺炎克雷伯分离株耐药性和毒力基因的相关性研究多的菌株，耐药基因分布数出现的几率就越小。用MEGA-4作出种系发生树如下图，共有A、B、C、D、E、F六个群，由图表看出A群为优势群，其次为B群。ESBLs主要在A群，其他群主要以非ESBLs为主。在A群中，非ESBLs中含有的毒力基因相对其他群非ESBLs中含有的毒力基因少，通过对应前面的耐药与毒力的关系，可发现B、C、D、E、F分类群是多毒力基因群，A群是少毒力基因群。各菌群间同源性较

8、高，存在某一克隆群的暴发。结论：肺炎克雷伯菌的耐药性与毒力基因分布存在着相关性，更倾向于存在负相关，毒力基因分布数越多的分离株，多重耐药现象出现的概率就越小，为临床上对该菌合理的治疗及抗生素的合理的使用提供了一些理论依据。根据种系发生树看出，院内感染的肺炎克雷伯菌有某一克隆株的流行和传播。关键词：肺炎克雷伯菌、耐药性、毒力基因、同源性分析作者：李艳萌指导老师：史进方徐杰II肺炎克雷伯分离株耐药性和毒力基因的相关性研究英文摘要Stud