肺炎链球菌临床分离株耐药机制和常见血清型及毒力基因研究

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1、分类号:R446.5学校代码:10062密级:学号:2012602718硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目:肺炎链球菌临床分离株耐药机制和常见血清型及毒力基因研究TITLEDistributionofserotypes,resistancedeterminantsandantimicrobialsusceptibilitiesofStreptococcuspneumoniaeisolates一级学科:临床医学二级学科:临床检验诊断学论文作者:刘学欣指导教师:胡志东主任技师天津医科大学研究生院二〇一五年五月分类号:R446.

2、5学校代码:10062密级:学号:2012602718学位类别:科学学位专业学位学科门类:医学硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目:肺炎链球菌临床分离株耐药机制和常见血清型及毒力基因研究TITLEDistributionofserotypes,resistancedeterminantsandantimicrobialsusceptibilitiesofStreptococcuspneumoniaeisolates一级学科:临床医学二级学科:临床检验诊断学论文作者:刘学欣指导教师:胡志东主任技师天津医科大学研究生院二〇一

3、五年五月学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外,论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名:日期:年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送

4、交论文,并编入有关数据库。保密,在年解密后适用本授权书。本论文属于不保密。(请在相对应的方框内打“√”)学位论文作者签名:日期:年月日导师签名:日期:年月日天津医科大学硕士学位论文中文摘要目的调查天津医科大学总医院临床分离肺炎链球菌对常用抗菌药物的敏感性,检测其常见血清型及毒力基因的分布情况,并对其耐药机制进行初步分析,为合理使用抗生素治疗肺炎链球菌感染提供依据同时控制该耐药菌株在医院内的传播。方法收集2012年10月至2014年4月天津医科大学总医院临床分离的非重复肺炎链球菌72株,应用Vitek-2compact全自动细菌分析系统及配套鉴定卡和

5、相应微量肉汤稀释试验分别进行菌种鉴定和药敏试验;应用聚合酶链反应(PCR)方法检测大环内酯类抗菌药物耐药基因,包括红霉素核糖体甲基化酶基因(ermB)、主动外排基因(mefA、mefE),四环素耐药基因(tetM)以及转座子整合酶基因(intTn);常见血清型基因(3、6A/B、14、15A、19A、19F、23F)及毒力基因自溶素基因(lytA)、溶血素基因(ply)及神经氨酸酶基因(nanA)。PCR扩增的基因阳性产物进行测序并与GenBank数据库比对。结果72株肺炎链球菌药敏结果显示,对万古霉素、利福平均敏感,对左氧氟沙星、头孢噻肟、氯霉素

6、、阿莫西林、青霉素敏感率大于76%,其中对青霉素耐药率PRSP为1.4%,中介率PISP为22.2%、敏感率PSSP为76.4%。对红霉素、克林霉素、四环素敏感率低于10%。72株肺炎链球菌携带红霉素耐药基因ermB65株(90.3%)、mefE17株(23.6%)、mefA9株(12.5%)、四环素耐药基因tetM63株(87.5%),转座子整合酶基因intTn62株(86.1%),其中ermB+tetM+intTn38株(52.8%)。对四环素耐药的肺炎链球菌tetM基因阳性率是93.8%,高于四环素敏感菌株(20%);对四环素耐药的菌株,其对

7、红霉素和克林霉素的耐药率亦高于四环素敏感的菌株;intTn基因阳性组的红霉素、克林霉素和四环素的耐药率较intTn基因阴性组高。72株肺炎链球菌常见血清型依次为19F(15,20.8%)、3(12,16.7%)、23F(9,12.5%)、6A/B(8,11.1%)、14(6,8.3%)、19A(4,5.6%)和15A(2,2.8%)。毒力基因检测结果为lytA65株(90.3%)、ply67株(93.1%)、nanA52株(72.2%),其中51株(70.8%)同时携带lytA、ply和nanA三种基因,12株(16.7%)同时携带lytA和ply

8、基因,1株(1.4%)同时携带ply和nanA基因。PCR扩增产物经测序并与GenBank数据库比对后均为目的基因。I天津

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