牛fabp3转基因小鼠的遗传检测及功能验证

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1、密级：论文编号:中囯农业科学院学位论文牛转基因小鼠的遗传检测及功能验证GeneticCharacteristicsandFunctionalVerificationofBovineFABP3GeneinTransgenicMice硕士研宄生：李娟指导教师：高雪副研宄员申请学位类别：农业推广硕士专业领域名称：养殖培养单位：北京畜牧兽医研宄所研宄生院2015年5月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研宄工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含

2、其他人己经发表或撰写过的研宄成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：之OlS年夕月y日关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，s卩：中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内

3、容。研究生签名：麵时间：年5月#日导师签名:时间：年』月〇曰中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目牛FABP3转基因小鼠的遗传检测和功能验证牛分子遗传论文作者李娟专业养殖研究方向育种与繁殖指导教师高雪副研宄员培养单位（研宄所）北京畜牧兽医研究所硕（博）姓名职称单位专业签名导师评硕导口动物遗传育王雅春教授北京农林科学院博导口种与繁殖阅硕导口动物遗传育人刘华贵研宄员中国农业大学博导口种与繁殖答辩主席张勤觀硕导口动物遗传育中国农业大学博导口种与繁殖硕导口动物遗传育张胜利教授中国农业大

4、学博导口种与繁殖硕导口动物遗传育王楚端教授中国农业大学博导口种与繁殖答硕导口动物遗传育孙东晓教授中国农业大学博导口种与繁殖辩硕导口中国农业科学院北京动物遗传育杜立新研宄员博导口畜牧兽医研究所种与繁殖委硕导口中国农业科学院北京动物遗传育王立贤研宄员博导口畜牧兽医研究所种与繁殖员硕导口中国农业科学院北京动物遗传育赵桂苹研究员博导口畜牧兽医研究所种与繁殖会议记录（秘书）陈燕助理研宄员（中国农业科学院北京畜牧兽医研宄所）论文答辩时间地点2015年5月27日下午于中国农业科学院北京畜牧兽医研宄所Secrec

5、y:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationGeneticCharacteristicsandFunctionalVerificationofBovineFABP3GeneinTransgenicMiceM.S.Candidate：LiJuanSupervisor：AssociateProf.GaoXueDegree：MasterofAgriculturalExtensionSpecialty:MolecularbiologyandBe

6、efbreedingMay2015摘要FABP3基因是影响牛肌内脂肪沉积的重要基因，与大理石花纹、背膘厚、剪切力等指标具有较高的相关性，因此，将该基因转入小鼠体内，研究牛FABP3基因在小鼠体内遗传和表达特性，明确该基因功能，对培育优质高产转基因肉牛新品种具有重要意义。本研究主要将牛FABP3基因转入小鼠体内，并检测了目的基因FABP3在转基因小鼠及其子代小鼠体内的遗传情况；同时，利用荧光定量和组织原位杂交技术验证小鼠不同组织中牛FABP3基因表达水平，以及转基因小鼠在营养调控下的脂肪代谢相关血液

7、生化指标差异，以期探明转牛FABP3基因小鼠的遗传与表达水平，为牛FABP3基因功能研究奠定基础，也为牛的分子遗传育种提供理论依据。本研究取得结果如下：（1）通过活体荧光鉴定和RT-PCR检测，结果表明前期获得4只G0转基因小鼠（2雌2雄）为阳性转基因个体，可以用于后续的遗传检测和基因功能研究。（2）对4只G0代阳性个体制定4组交配方案并获得G1代子鼠，对G1子鼠进行PCR扩增检测和测序及Blast比对，结果表明阳性个体扩增片段均包含EGFP报告基因和牛FABP3目的基因；G1代子鼠平均阳性率为6

8、7.8%，且不同组间阳性率存在差异，其中组1阳性率最高为100%。（3）对G1代转基因阳性率为100%的组1内个体进行随机交配并传代至G4代，通过PCR扩增检测和测序及Blast比对发现，G2代子鼠平均阳性率为100%，G3代为33.3%，G4代为18.75明，G0代转基因阳性小鼠可将目的基因遗传给后代，但随着代次的增加，目的基因在后代个体中比例呈下降。（4）利用实时荧光定量PCR技术，在mRNA水平对牛FABP3基因在G0代和G1代小鼠心脏、肝脏、肾脏、骨骼肌组织的表达情况进行了