杭白芍种胚丛生芽诱导途径再生体系的初步建立

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1、分类号S682密级公开UDC学位论文杭白芍种胚丛生芽诱导途径再生体系的初步建立ThePreliminaryEstablishmentofPlantRegenerrationSystemaboutPaeonialactiflora‘HangBai’EmbryoDirectOganogen-esisbyTheWayofMultipleShootClumpsIndution杜霞指导教师姓名王雁研究员申请学位级别硕士专业学位专业名称风景园林研究方向园林植物应用论文提交日期2015年5月论文答辩日期2015年6月学位授予日期2015

2、年7月答辩委员会主席孙振元评阅人北京·中国林业科学研究院学位论文杭白芍种胚丛生芽诱导途径再生体系的初步建立学位论文作者杜霞指导教师姓名王雁研究员申请学位级别硕士专业名称风景园林研究方向园林植物应用论文答辩日期2015年6月中国·北京DissertationfortheDegreeThePreliminaryEstablishmentofPlantRegenerrationSystemaboutPaeonialactiflora‘HangBai’EmbryoDirectOganogen-esisbyTheWayofMulti

3、pleShootClumpsIndutionCandidate:DuXiaSupervisor:ProfessorWangYanAcademicDegreeAppliedfor:MasterofProfessionalDegreeSpeciality:LandscapeArchitectureDateofDefence:June,2015Degree-conferring-institution:ChineseAcademyofForestry独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得

4、的研究成果。尽我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得本研究生培养单位或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研巧所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名；曰期年占月皆曰瓜電：少０咬学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解中国林业科学研究院有关保留、使用学位论文的规定，中国林业科学研究院有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权中

5、国林业科学研究院可将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可（＾采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：也農导师签名：如戸月＇年月甘ｄｏ咬年＾長曰ｒ《ｃＵ咬义摘要芍药（PaeonialactifloraPall.）作为我国传统名贵花卉深受人们喜爱，长期以来由于繁殖系数低，繁殖周期长限制了芍药育种进程和产业发展，一直以来寄望于芍药组织培养再生体系的建立实现芍药快速扩繁因存在诸多基础难题而始终没有实现。本研究以药用、油用价

6、值极高的杭白芍（P.lactiflora‘HangBai’）品种为研究对象，通过不同种类植物生长调节剂配比诱导种胚外植体产生丛生芽，实现丛生芽增殖扩繁，进一步诱导丛生芽苗生根形成完整植株，初步建立了芍药种胚丛生芽诱导途径的直接器官发生再生体系。该途径不需经过脱分化和再分化过程，大大缩短了再生周期，同时采用种胚建立的无菌体系克服了芍药外植体初代培养出现的污染难以控制问题和后期生根诱导困难等基础难题。本试验材料取自山东菏泽曹州牡丹园，试验于7月下旬杭白芍（花期5月上旬）果荚初裂、种子由绿转为深褐色时进行采收，洗净后存储于4℃冰

7、箱内进行试验研究。试验研究主要结果如下：1.接种前对种子经过52h蒸馏水浸种处理后，使用70%乙醇灭菌处理30s结合2.0%次氯酸钠灭菌处理15～20min后剥离胚进行接种，灭菌效果好，外植体材料污染率低7.89%且接种时胚损失率低6.60%。2.胚培养条件控制中通过设置不同时间梯度的暗培养处理得出杭白芍胚萌发率及胚生长发育与暗培养处理没有直接关系。3.适宜的杭白芍胚成苗培养基是MS+6-BA1.0mg/L+GA31.0mg/L，接种7d后萌发，种胚萌发率为90%以上，大大提高了芍药胚萌发率，同时打破芍药种胚休眠，缩短了育

8、种周期。比芍药在自然条件下播种经过7个月萌发，萌发率约40%和使用植物激素处理打破种子休眠后播种3个月萌发，萌发率60%-80%，有着明显的优势。4.试验结果认为活性炭会促进种胚胚根的优先发育，随着活性炭含量的增加，胚根发育较快，根系生长纤细，真叶萌发迟缓，最终难以形成健壮的胚苗。在未添加活性炭的培养基