芽胞杆菌对f4abac~+大肠杆菌感染f4abacr~-断奶仔猪肠道黏膜t细胞免疫应答的影响

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1、ｉｕｗｙ单位代码：分类号：１密级学号：Ｂ１１０４１９４；乂ｆ的少ｔ令博±学位论文＋芽胞杆菌对Ｆ４ａｂ／ａｃ大肠杆菌感染Ｆ４ａｂ／ａｃＲＴ断奶仔猪肠道郵膜Ｔ细胞免疫应答的穀响ＥｆｆｅｃｏｎｉｎｔｅｓｔｉｎａｌＴＣｅｌｌｓＩｍｍｕｎｅ民ｅｓｏｎｓｅｓｔｓｏｆ公口Ｃ／／／Ｗｐ＋—仿ｉｎＦ４民ＷｅａｎｅｄＰｉｇｌｅｔｓＣｈａｌｌｅｎｇｅｄｗ化Ｆ４ｃ／ｚｅｒ／ｃＡ／ａｃｏ／／研究生：周栋指导教师：王九峰教授合作指导教师：朱耍旁副教授申

2、请学位口类级别：灰举博±：临床兽医学专业名称研究方向：巧科学与内科诊断学所在学院：动物民学院２０１５年１１月本研究为教育部新世纪优秀人才支持计划（ＮＣＥＴ－１０－０７９１）家自然科学基金（３１３７２４％、，国３１４７２２４２），国家公益性行业（农业）科研专项（Ｎｏ．２０１４０３０５４）资助项目独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰

3、写过的研巧成果，也不包含为获得中国农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用巧的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研巧生签名：时间：１？化年＂月日＞关于论文使用授权的说明本人完全了解中国农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留，、送交论文的复印件和磁盘允许论文被查阅和借阅，可Ｗ采用影印缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文＾、。同意中国农业大学可！＾？用不同方式在不同媒体上发表传播学位论文的全部或部分内容。（保密的

4、学位论文在解密后应遵守此协议）研究生签名：时间：王年月巧）ｄ导师签名＇：时间：少年Ｊ作ＸＩ日摘要＋断奶仔猪腹泻严重威胁着我国养猪业的发展，其中Ｆ４ａｂ／ａｃ大肠杆菌在断奶仔猪腹湾中占有＇＋重要地位。虽然Ｆ４受体阴性（Ｆ４Ｒ）断奶仔猪能够降低Ｆ４大厥杆菌引起的断奶仔猪腹泻，但目＋？前Ｆ４大肠巧菌对Ｆ４Ｒ断奶巧猪免疫调节作用机理的研究仍然处于探索阶段。特定的益生菌银合制剂能够増强肠道内调节性Ｔ细胞的功能，维持脑道免疫稳态，提高抵抗病原菌侵袭能力，因此益生菌成为防治肠道细菌疾病的潜在抗生

5、素替代品。地衣芽胞杆菌与枯草芽胞杆茜可调节肠道免疫功能，已被用于生产实践，但芽胞轩菌混合制剂与断奶仔猪肠道Ｔ细胞免疫系统之间的作用机制仍不清楚。＇因此，本试验用ＤＮＡ为基础的Ｍｕｃ４基因多态性筛选出的３２头２Ｆ４ａｂ／ａｉｎ１日龄ｃＲ巧奶仔猪并＇一的１一随机分四姐，每組８头（：〇：９〇〇＾２（：：１）第周每天：灌服无菌生理盐水１〇０１１；）６了６：第周９＋每天９：００灌服无菌生理盐水１０ｍＬ，第８天９：００灌服浓度知０ＣＦＵ／ｍＬ的Ｆ４ａｂ／ａｃ大肠杆菌１０７一ｍＬ；３）ＬＤＢＥ

6、：第周每天９：００灌服浓度为３．９ｘｌｏｃＦＵ／ｍＬ的低剂量芽胞杆菌漏合制剂１０ｍＬ，＋９００〇〇抓止的？４一第８天９：灌服浓度为１／１１３１）／３〇大麻杆菌１０抽１；４）扭姐＆第周９：００每天灌服７９Ｘ浓度为７．８１０ＣＦＵ／ｍＬ的高剂量芽胞杆菌混合制剂１０ｍＬ，第８天９：００灌服浓度为１０ＣＦＵ／ｍＬ的＋Ｆ４ａｂ－／ａｃ大肠杆菌１０ｍＬ；记录采食量、体重。第１５天，试验用猪全部麻醉后宰杀。用苏木精伊红（Ｈ＆Ｅ）染色法分析小肠炎症情况；流式细胞术分析外周血和抵道相关淋臣狙织中Ｔｒｅ

7、ｇ细胞－－ＳＡ０正－－亚群动态变化；ＥＬＩ法检测血清白介素１（１０），正１７Ａ，ＴＮＦａ和ＩｇＡ浓度；ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ检测Ｔ纽施相关基因在肠道的表达；＋试验结果表明，Ｆ４ａｂ／ａｃ大厥杆菌引起了Ｆ４ａｂ／ａｃＲｌｆ猪的发烧、肠炎，饲喂低剂量芽胞杆菌＋显著改善了大麻杆菌引起的巧猪发热，脑道炎症等症状。饲喂芽施杆菌混合制剂能够增Ｆ４ａｂ／ａｃ＋＂＋＋＋４３－０Ｔ３－加血液中ＣＤＴ细胞亚群中ＦｏｘｐＸ１ｒｅｇ细胞的比例升高，但Ｆｏｘｐ正１０Ｔｒｅｇ细胞比例并为増加－６打化及转录因子

8、巧议。低剂量芽胞杆菌混合制剂导致了空肠中化，知巧表达量的增加。在厥道Ｔ细胞免疫方面，提前饲喂高剂量或者低剂量芽胞杆茵泡合制剂导致了＋－＋Ｆ４ａｂ／ａｃＥＴＥＣ感染的Ｆ４民仔猪上皮内淋己细胞中ＣＤ４寸ｏｘ３Ｔｒｅ细胞比例的升窩，或者固有层ｐｇ＋＋＋＾－比例的升高－Ｗ及派伊氏结中ＣＤ４正１０Ｔ细胞。其中产生ＩＬ１０的ＣＤ４Ｔ细胞主要是Ｆｏｘ３１ＬＩ０ｐ＋＋