深低温冷冻去细胞肌腱移植的组织学和生物力学研究

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1、深低温冷冻去细胞肌腱移植的组织学和生物力学研究Histologicalandbiomechanicalstudiesofdeep-frozenacellulartendongrafting作者姓名：苑生专业名称：外科学指导教师：张巨教授学位类别：医学硕士答辩日期：年月日未经本论文作者的书面授权，依法收存和保管本论文书面版本、电子版本的任何单位和个人，均不得对本论文的全部或部分内容进行任何形式的复制、修改、发行、出租、改编等有碍作者著作权的商业性使用（但纯学术性使用不在此限）。否则，应承担侵权的法律责任。吉林大学

2、硕士学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交学位论文，是本人在指导教师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日中文摘要深低温冷冻去细胞肌腱移植的组织学和生物力学研究背景及目的：在临床工作中经常会遇到肌腱缺损需要移植肌腱进行修复的情况，目前的治疗的“金标准”是自体肌腱移植，但自体肌腱来源非常有限，

3、同时自体肌腱移植还会造成供区功能丧失；而同种异体肌腱移植、异种肌腱移植存在着免疫排斥反应，会导致移植物坏死、局部炎症反应等严重并发症。最终解决这些问题需要依靠肌腱愈合机制的基础研究以及组织工程学肌腱研究的进展来解决。目前学者认为肌腱愈合有两种方式，一种认为肌腱愈合是依靠腱周组织长入形成粘连的外源性愈合，据此推论肌腱移植中移植肌腱仅起到支架和通路作用。另一种是内源性愈合，认为肌腱可依靠肌腱内细胞自身再生增殖和合成胶原直接完成愈合修复。这两种愈肌腱合方式何者、何时、何种情况下在肌腱移植修复中起主要作用尚不清楚。与此

4、同时失去内源性愈合的去细胞肌腱移植物能否达到生物力学要求尚有争议。因此我们设计了本实验，通过对比观察去细胞大鼠跟腱移植和未经处理的大鼠跟腱移植的组织学和生物力学特性，研究去除肌腱内细胞对移植肌腱愈合的影响，探讨肌腱愈合的机制，为组织工程学肌腱研究做准备。方法：实验选用96只健康成年雄性Wistar大白鼠为实验动物,将大鼠随机分成为实验组和对照组，制备跟腱缺损动物模型。实验组大鼠行深低温冻融冷冻去细胞跟腱自体移植，而对照组行自体跟腱移植。在术后1、2、4、8周处死大鼠取移植跟腱，在光学显微镜下进行HE染色形态学观

5、察，I型和IIII型胶原免疫组化染色观察及图像分析，并测量移植跟腱最大载荷和弹性模量生物力学参数，进行统计学分析。结果：实验结果显示:随着跟腱移植后时间延长，移植跟腱内I型和III型胶原表达逐渐增加，其中1周、2周时对照组表达水平高于实验组（P<0.05),而4周和8周时两组表达无显著差异（P>0.05)；移植跟腱生物力学检测结果显示1、2周时对照组跟腱最大载荷和弹性模量均高于实验组（P<0.05），而4、8周时两组差异无显著性（P>0.05)。结论：本实验借助深低温去细胞跟腱移植与新鲜跟腱移植做组织学和生物力

6、学特性比较，发现去细胞的肌腱移植物较之未经处理的移植物愈合滞后，同时发现了此种去细胞肌腱移植体在晚期可满足生物力学强度的需要。通过对本实验结果分析证明：深低温处理去细胞肌腱移植和自体移植远期生物学效果近似，去细胞肌腱可用于肌腱缺损的移植治疗；同时也证明了去细胞肌腱移植物用于异体肌腱移植的可行性。为进一步组织工程学肌腱研究做了基础理论准备。关键词：肌腱；跟腱缺损；移植；生物力学IIAbstractHistologicalandbiomechanicalstudiesofdeep-frozenacellularte

7、ndongraftingObjective：Tostudytheinfluenceofdecellularizationontendongrafthealingandinvestigatemechanismoftendonhealing,wecomparedthehistologicalandbiomechanicalcharacteristicsofdeep-frozenacellulartendongraftingwithfreshtendonautografting.Methods：Ninety-sixW

8、istarratsweredividedintoexperimentalandcontrolgroupsrandomly.Theratsinexperimentalgroupexperienceddeep-frozenacellularAchillestendonautografting,andtheratsincontrolgroupunderwentAchillestendonau