无芒隐子草lea2aldh12a1基因和bar基因共转化紫花苜蓿的研究

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1、分类号：巧级：Ｗ續乂ｆ研究生学位论文＊如？基因无芒隐子草基因和／■ｒ论文题目（中文）共转化紫花首黯的研究＇古爲．－辛ＳｔｕｄｏｎＣ０化ａｎｓｆｔ）ｒｍａｔｉｏｎｏｆｙ论文题目１２／（克４主／）化？么４７ａｎｄ巧Ｗｅｎｅｓｉｎ化（外文）供王￡＞ｇＭｅ出ｃａｏｓａｔｉｖａｈ．ｇ研究生姓名段珍学科？草坪生物学、专业生物学研究方向草坪植物种质资源评价与利用学位级别硕±导师姓名、职称张吉宇副教授论文Ｘ作２０１２年９月至２０１５年

2、５月起止年月论文提交日期２０１５年６月论文答辩日期２０１５年５月学位授予日期２０１５年６月校址：甘肃省兰州市辞％Ｉｔ■＇＞＂占ｒ４原创性声明本人郑重声明：本人所呈交的学位论文，是在导师的指导下独立进行研究所取得的成果。学位论文中凡引用他人已经发表或未发表的成果、数据、观点等，均已明确注明出处。除文中已经注明引用的内容外，不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究成果做出重要贡献的个人和集体，均已在文中Ｗ明确方式标明。本声明的法律责任由本人承

3、担。亏论文作者签名：方：暖令日期心Ｌ乂关于学位论文使用授权的声明本人在导师指导下所完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属兰州大学。本人完全了解兰州大学有关保存、使用学位论文的规定，同意学校保存或向，允许论文被查阅和借阅国家有关部口或机构送交论文的纸质版和电子版；本人授权兰州大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用任何复制手段保存和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或一署名单位仍然为兰州大学与该论文直接相关的学术论文或成果时，第。本学位论文研究内容；

4、ｙ＆ｗ公开□不宜公开，已在学位办公室办理保密申请，解密后适用本授权书。一＂＂（请在Ｗ上选项内选择其中项打Ｖ）论文作者签名；挺冷导师签名：．、．〇１．乎仁、名日期：２１９日期：＾＾无芒隐子草Ｌ必＾基因和公ｗ基因共转化紫花首覆的研究中文摘要干旱和盐碱等非生物因素是限制紫花首精（Ｍｅ波ｃａｇＯＭ化ｏＬ．）生长的主要因素，利用转基因技术培育抗除草剂和抗逆的优良首靖新品系具有重要的现实意，义。在前期研究中，我们Ｗ禾本科超旱生草坪草无芒隐子草为材料克隆了两个２心’基因仁５１以２和。心

5、，心公妨２７４７：公月７在拟南芥中研究表明：扮么￡心和打？基因过表达能提高拟南芥植株的抗旱性。本研究将抗除草剂的基因分别和这两个基因共转化紫花首荐，并对其ＴＯ代转基因植株进行耐旱和耐盐性分析，得出如下结果：１．Ｗ紫花首稽的下胚轴作为受体，采用农杆菌介导法用质粒ｐＥａｒｌｙｇａｔｅｌＯｌ公幻－ｊ站ｒ：：Ｃ？ＬＥ４２和ｐＥａｒｌｙｇａｔｅｌＯｌ公２心转化紫花首措，分别得至Ｉｊ１１９株转仁沁＆０基因和９０株转。ｙ４ＬＤ／／７２如基因的抗性植株。２．对所有植株进行喷施ＩｍＬ／Ｌ１０％Ｂａｓｔａ溶液初

6、步筛选，分别有４０株转。方＆４２基因的紫花首宿和５４株转化？２４７基因的紫花首猜可对除草剂－产生抗性，对这些转基因株系进行ＰＣ民和民ＴＰＣ民分子水平上的鉴定，分别有３９株转ＯＩＥ４２基因首精和１６株转Ｃｓ心０好７２＾／基因首猜可Ｗ扩增到日的条带ＰＣ民阳９７％和２９．６％。并正常表达。性率分别为．５３．对转基因首荐ＴＯ代植株进行耐旱和耐盐性鉴定试验。基因表达分析发现干旱和盐胁迫都可Ｗ诱导ＣｓＺＥ４２基因和ＣｓＡＬ公７／７２＾／基因在叶中的大量表达，在干旱第１５ｄ和２００ｍＭＮａＣｌ处理第１０ｄ基因

7、在叶中的表达量分别是５．．５７倍和４．６６倍６．１１倍和６８７对照的；仿仏Ｄ妨基因是倍。表型观察发现，经过１５天的干旱胁迫，非转基因植株的叶片基本枯黄，ＴＯ代转基因首猜植株则表现出萎嘉症状，且在恢复涛水后长势恢复正常，而非转基因植株则无法恢复盐胁迫１０天后，转基因植株ＴＯ代的生长状态比非转基因植；株好。表明Ｃ山＆４２基因和。心公优２如基因的超表法使转基因植株具有更好的耐旱性和耐盐性。生理生化指标测定发现，ＴＯ代转基因植株的生物量、叶片相对含水量、叶绿素萊光仍／Ｆｍ、叶绿素相对含量、净光合速率化和Ｐ

8、ｒｏ含量在干旱和ＮａＣｌ胁迫条件下都高于非转基因植株，且ＭＤＡ含量显著低于非转基因植株（尸＜０．０５）。Ｉ另外，Ｃ化以２基因和Ｃｙ心。饼２如基因的超表达使转基因植株在ＮａＣＩ胁迫条Ｎ＋件下相对减少叶片中ａ含量降低毒害起到保护作用。关键词：执