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1、第30卷第1期作物学报Vol.30,No.12004年1月26~30页ACTAAGRONOMICASINICApp.26~30Jan.,2004共转化法剔除转基因小麦中的bar基因1,21,*111221张新梅徐惠君杜丽璞叶兴国辛志勇郭蔼光薛崧马有志(1中国农业科学院作物育种栽培研究所,农业部作物遗传育种重点实验室,北京100081;2西北农林科技大学生命科学院,陕西杨凌712100)摘要利用PCR检测了268株转小麦黄花叶病病毒复制酶基因T3代植株,初步筛选出只含有功能基因(WYMVNib8基因)而不
2、含有筛选标记基因(bar基因)的转基因小麦植株28棵,为转基因小麦的安全性种植提供了保障。同时对无标记基因的转基因植株进行了叶片涂抹除草剂验证,探讨了叶片涂抹除草剂结合目的基因PCR检测筛选无选择标记转基因植株的可行性。关键词小麦;转基因;共转化;安全性中图分类号:S512ExcisionofbarGenefromTransgenicWheatObtainedbyBiolisticCotransformation1,21,*11122ZHANGXinMei,XUHuiJun,DULiPu,YEXingGuo,
3、XINZhiYong,GUOAiGuang,XUESong,MAYou1Zhi(1InstituteofCropBreedingandCultivationCAAS,MinistryKeyLabforCropGeneticsandBreeding,Beijing100081;2CollegeofLifeScience,NorthwestSciTechUniversityofAgricultureandForestry,Yangling,Shaanxi,712100,China)AbstractTransgenic
4、cropshavedevelopedincommercializedscaleinsomecountries,buttheirbiosafetyhaveattractedpublicconcernsintheworldatthesametime.Therefore,itisbecomingmoreandmoreimportanttoeliminatetheselectivegenesbecauseoftheirnegativefunctions,suchasantibioticsresistanceandherbicide
5、resistance.268T3transgenicwheatplantsofYangmai158containingwheatyellowmosaicvirusresistancegeneandbarselectiongene,whichwereobtainedbybiolisticparticlecotransformation,wereanalyzedbyPCRinthisstudy,and28plantsonlywiththetargetgenewereidentifiedfinally.Moreover,le
6、afpaintingofherbicidewasappliedtoconfirmthemarkerfreetransgenicplants.ItcouldbemoreefficienttocombineleafpaintingandPCRtoselectbarfreetransgenicwheat.KeywordsWheat;Transgenicplant;Cotransformation;Biosafety[1]利用转基因技术进行作物品种改良已成为一种于转基因植物中引起的。安全性评估部门已报有效的育种途径,将优良
7、的外源基因导入育种材料,道,使用新霉素磷酸转移酶作为选择标记基因不存可望培育有生产价值的转基因小麦新品种。随着植在健康或安全方面的问题,然而,对其他选择标记基物遗传工程的发展,已经产生了大量具有人们所期因及其产物进行安全性评价,将耗费大量物力、财力望性状的农作物。近几年来,转基因作物商品化生及时间,影响转基因植物投入市场。一个更为有效产和小规模田间释放的不断增加,转基因作物的安的办法是从宿主基因组中除掉这些选择标记基[2]全性问题日益受到人们的重视,其可能导致的潜在因。目前利用基因工程技术剔除标记基因的方法生态风险性成为人
8、们关注与争论的焦点,这些问题主要有共转化、位点专一性重组、转座子、同源重组[2~5]主要由于抗生素或除草剂抗性的选择标记基因存留等。本研究是利用转基因的共转化方法,通过基金项目:国家863项目(2001AA212111)资助。作者简介:张新梅(1976-),女,陕西杨凌人,在读硕士。*通讯作者:徐惠君