刺参养殖添加菌的筛选、特性分析及应用效果研究

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1、分类号＾单位代码：１０１６０２０１２２００６１学号：？赛番ｆ後硕壬学位论文题目、特性分析及应用效果：刺参养殖添加菌的躺选研究Ｓｔｕｄｏｎｔｈｅｉｓｏｌａｔｉｏｎｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｙ，ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓａｎｄｉｔｓａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｓｉｎｆｅｅｄｉｎｇｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｏｆＡｐｏｓｔｉｃｈｏｐｕｓａｏｎｉｃｕｓｊｐ硏究生：李丽丽导师：顾英…学科专业：粮食油脂及植物蛋白工程３一２０论女课题起止时间；２０１年３月１５

2、年３月论文完成时间：２０１５年３月过宁医学院研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特別加Ｌ乂标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，化不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料一，与我同工作的同志对本研究所做的任何贾献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处一，本人承担巧相关责任。论文作者签省：日期：Ｌ／／辽宁医学院研究生学位论文版权使用授权书本人

3、完全了解巧宁医学院有关保护知巧产权的规定，目Ｐ：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属巧宁医学院。本人保证毕业且离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为巧宁医学院，导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为巧宁医学院。学校有权保留并向国家有关部口或化构送交论文的复印件和撫盘，允许论文被查阅和借阅。学校可！＾乂公布学位论文的全部或部分内容（保密内容除外），Ｌ乂采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签雀：店廟指导教师签名：度衰喪目录一、摘要中文论著摘要……………………………………………………………1英文论

4、著摘要……………………………………………………………4二、英文缩略语…………………………………………………………7三、论文前言………………………………………………………………………8实验材料与方法…………………………………………………………9实验结果…………………………………………………………………14讨论………………………………………………………………………35结论………………………………………………………………………38四、本研究创新性的自我评价…………………………………………40五、参考文献……………………………………………………………41

5、六、附录文献综述…………………………………………………………………44致谢………………………………………………………………….…..52个人简介………………………………………………………………….53·中文论著摘要·刺参养殖添加菌的筛选、特性分析及应用效果研究目的通过实验初步鉴定和筛选对刺参的免疫酶和消化酶具有作用的益生芽孢杆菌，构建提高刺参免疫力、促进消化的益生菌剂，为刺参养殖业发展提供理论依据。方法采用涂布平板法和平板划线法分离筛选健康刺参养殖池塘和刺参肠道内的益生菌株，通过革兰氏染色、生理生化及菌株的16SrDNA同源分析对菌株进行鉴定。采

6、用分光光度法研究菌株的生长特性。利用淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶选择培养基筛选产酶菌株。采用刺参急性攻毒试验评价5株菌株的安全性。采用刺参饲喂试验，以刺参体腔液中的酸性磷酸酶（ACP）、碱性磷酸酶（AKP）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、酚氧化酶（PO）活性、肠道内蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性为指标，筛选出对刺参具有刺激作用的菌株。通过正交实验探索复合菌株的最佳配比。结果从辽东湾健康的刺参养殖池塘沉积物和健康刺参肠道中筛选出5株菌株编号为B1、B2、B4、B6、B7菌株。通过菌落形态观察、生理生化特征、革兰氏染色和16SrDNA同源性分析，确定这5株菌

7、株为芽孢杆菌属，B1菌株为谷死芽孢杆菌，B2枯草芽孢杆菌、B4为芽孢杆菌，B6菌株为甲基营养化芽孢杆菌，B7菌株为阿氏芽孢杆菌。菌株生长特性、产酶特性结果表明：B1、B2和B4菌株的适宜生长温度为20℃~35℃。菌株B6和B7在15℃~35℃内长势良好；5株菌的生长pH范围1宽泛，菌株B1、B4和B6的最适pH范围为6.0~9.0，B2和B7菌株的生长的最适pH范围为6.0~8.0；菌株B1、B4和B7生长的最适盐度为3%~7.5%，B2和B6菌株生长的最适盐度为3%~5%。产酶特性分析结果表明，5株菌株都产蛋白酶、淀粉酶，只有菌株B1和B7产脂

8、肪酶。通过刺参急性攻毒试验得出5株菌株在终浓度≤1500mg/L范围内，5株菌株是安全的。通过饲喂刺参不同菌株，考察菌株对刺参的刺激作用