兴安落叶松knox基因的克隆及特性分析

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2、甘＇ｙ．：兴安落叶松仪ｖｏｘ基因的克隆及特性分析．？＇，？‘？，＇＜苗？■＞ＣｌｏｎｉｎｇａｎｄＣｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆＫＮＯＸＧｅｎｅｆｒｏｍＬａｒｉｘ？＜、－．．ｍｅｌｉｎｉｉｇ．ｆ．＇乂‘．一‘疗乂Ｖ＇社ＩＩ？■＜？．！－？产产，、＇＇－．．申请人；李雪辉Ｖ＞，片音＼、：＇＇．＂＞，去．学科ｎ类；农学：ｌ＼Ｖ；－＂、’＾－三￣－．？｛学科专业：林木遗传育种巧：、Ｖ打？，？、一

3、？－－－韦？、Ｖ计中？研究方向：林业生物技术．－１ｔ．：、‘？ｉＳ指导教师；张文波副教授，＜＇ｒ．ｗ．－．．，ｔ一．、．、．ｆ二〇－论文提交曰期：五年六月＇？Ｘ．．．，－Ｊ？？＇一．，．？、－－一户片．内蒙古农业大学研究生学位论文独创声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究。工作及取得的研究成果据我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，也不包，论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果一括为获得我校或其他

4、教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。一申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担切相关责任。论文作者签名；日期：若内蒙古农业大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解内蒙古农业大学有关保护知识产权的规定，即；研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属内蒙古农业大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为内蒙古农业大学，且导师为通讯作者，通巧作者单位亦署名为内蒙古农业大学。学校有权保留并向国

5、家有关部口或机构送交论文的复印件和电。子文档，允许论文被畜阅和借阅学校可Ｗ公布学位论文的全部或部分内容（保密内容除外），采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名；皆豕指导教师签名：鄉讀日期／：入ｈ／—摘要〇／ｗｅｏ６ｏｘ同源异形盒基因（片，扮化化）是编码控制多细施真核生物发育的转录调控因子，，参与调控细胞分化的过程在生物的形态建成中发挥着重要作用。兴安落叶松（Ｉ口放巧７２如ｍＹ）是东北地区的主要计叶林树种，因其巨大的经济价值，独特的生态意义，所Ｗ对兴安落叶松的研巧尤为重

6、要。为掲示兴安落叶松木材形成的机理，本研究Ｗ原产于大兴安岭地区的兴安落叶松为材料，分离材巧形成相关的ＫＷＱ义并对其表达特性和功能进行了研究，Ｗ期从分子水平上揭示该基因在木材形成中的作用，为利用基因工程手段实现兴安落叶松木材形成的调控，进而为选育新树种提供理论基础：。研究结果如下必ＶＯｙ基因的克隆及其生物信息学分析－１．王ｇ。本研究利用ＲＴＰＣ民及ＲＡＣＥ技胆ＷＺ基因的一术得到兴安落叶松ｉｇｃＤＮＡ全长序列１６５９ｂｐ，其中包含个１５０２ｂｐ’’的开放阅读框，编码４７４个氨基酸，５非编码区７７

7、ｂ，３的ｐ非编码区４７ｂｐ；所编码＝５．。蛋白质分子量为．２１ｋＤａ，理论等电点ＰＩ５６８蛋白结构分析表亂该基因所编码的氨基酸包含４个保守结构域：ＫＮＯＸ１、ＫＮＯＸ２、ＥＬＫ和ＨＯＭＥＯＢＯＸ，属于非典型ＫＮＯＸ蛋白。系统进化树分析表明，王扭ＷＣ化基因属于Ｉ类ＫＮＯＸ家族，与桃树及裸子桂物火炬松扮炒基因亲缘关系较近。－２．货ＶＣ化基因的表达特性。半定量ＲＴＰＣ民检测结果显示每，Ｚ班Ａ口Ｘ在兴安落叶松的根、幼茎、针叶中均表达，在茎中表达量最高该基因的表达受赤霉素、脱；落酸和细胞分裂素的诱导，

8、在ＡＢＡ处理后贷化货基因表达量增加。－３．ＩＰＣ民方法ｇＫＴＷＺ基因启动子序列的克隆及分析。利用ＴＡＩＸ，克隆了９３１ｂｐＡ啦ＶＯＸ启动子序列一的王ｇ，些响应生物和非生物因子及植物激素的功能元件被发现存于该基因的启动子区域一。证实该基因的表达受到激素及些生物和非生物环境因子的调控。