探索魔芋葡甘聚糖改性与固定化脲酶应用研究

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1、南京理工大学硕士学位论文魔芋葡甘聚糖改性与固定化脲酶应用研究姓名：朱琰申请学位级别：硕士专业：化学工艺指导教师：张丽20080627硕士论文魔芋葡甘聚糖改性与固定化脲酶应用研究摘要本文主要研究了KGM改性及应用于脲酶固定化。分别研究制备出理海绵状KGM载体，交联KGM载体及KGM．海藻酸钙微球载体，分析讨论了固定化前后脲酶酶学性质的变化。光镜，扫描电镜和FT-IR红外光谱对载体结构的表征结果为实验提供了理论支持。实验结果如下：海绵状载体固定化脲酶，经低温冷冻处理后再进行不溶处理得到的载体呈海绵弹性状，载体机械强度，固定化酶的储存稳定性及重复使用性有很大的提高；固定化酶对pI-I更加

2、敏感，在7．5时活力非常突出；与游离脲酶相比对底物具有更好的亲和力。交联KGM固定化脲酶具有很好的储存稳定性，储存在4。C冰箱中一个月活力损失较小，lO．09固定化脲酶装柱连续使用三天(催化1000m10．3mol／L尿素．0．05mol／LpH7．0磷酸盐缓冲溶液)后，保鲜膜密封储存于4。C冰箱中，四个月后活力仍保持在40％左右。KGM．海藻酸钙微球载体固定化脲酶活力可高达8．9U／g；通过改变KGM、海藻酸钠溶胶比例、壳聚糖浓度可以调节脲酶缓释的速度以及载体机械强度。此方法制备工艺简单，条件温和，载体形态规则均一，适合从蛋白质活性药物，酶类到疏水合成药物的包埋固定，较适于规模生

3、产。关键词：KGM，戊二醛，交联，环氧氯丙烷，海藻酸钠，壳聚糖，脲酶固定化Abstraet硕．I：论文ABSTRACTInthispaper,themodificationofKGMandapplytheminureaseimmobilizationhavebeenresearched．ConcentrateonspongeKGMcarrier,CROSS-linkingKGMcarrierandKGM—ALGmicroballoonsphere．Besidesthese，propertiesofthefreeill'easeandimmobilizedul'easewereals

4、odiscussed．Thecharacterizationsbylightmicroscope，SEMandFT-IRprovideacademicsupports．Theconductoflowtemperaturetreatmentbeforeinfusibilitytreatmentmadethecarriershowallappearanceofspongeandspringiness．Its’propertiessuch弱merchanicintensity,storagestabilityandusingabilityareallimproved．Anditboast

5、sahi曲sensitivityinthechangeofpHandhasabettercompatibilityonsubstraet．ThecrOSS-linkingimmobilizedHi'easeenjoysgreatstoragestability,afterstoredin40Cforabout30days，its’enzymeactivityappearslitterlose．Whenweinstall10．09immobilizedureaseofthisl(indintoapillaranduseittocatalyseurea-phosphatebuffere

6、dsolutionfor3daysinrun,totallycatalyse1000mlurea-phosphatebufferedsolution,andthensealeditwithfilm，storeditinoCforaroundfourmonths，andtheenzymeactivityremains40％．KGM-ALGmicroballoonsphereimmobilizedureaseboastsgoodenzymeactivityOVer8．9U／g．WeCanadjusttheenzymereleaserateandmerchanicintensitythr

7、oughchangingtheproportionofKGM，ALGsolandtheconcentrationofchitosan．Themethodiseasy-conduct，mild-condition，firingmanysubstances’immobilizationfromactiveproteinmedicine，enzymetohydrophobe，andavailableformassiveproduction．Keywords：KGM，glut