食品中赭曲霉毒素a的免疫阻抗传感器建立的研究

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1、分类号：密级：ＵＤＣ；学号：４１７２１４９１４１１８南昌大学专业学位硕±硏究生学位论文食品中赫曲霉毒素乂的免疫阻抗传感器建立的研究ＴｈｅＳｔｕｄｙｏｎＥｓｆ：ａｂｌｉｓｈｅｄｏｆＩｍｍｕｎｅｓｅｎｓｏｒｆｏｒＯｃｈｒａｆ：ｏｘｉｎＡｉｎＦｏｏｄ杨绍珍培养单位（院：、系）食品学院指导教师姓名：，、职称许杨教授指导教师姓名、职称：陆佩华工程师专业学位种类：工程硕±专业领域名称：食品工程论文答辩日期２０１６５２６日：年月答辩委员会主席：身或ｆ＜兔系片评阅人：—吏—２０１

2、６年０５月２６日一、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的．切悅成果。据我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得盧昼丈堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已化论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名（手写）；签字ＦＩ期：７１放《年＾月皆Ｈ搞繞為二、学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，Ｉ可意学校巧权保留并向閨家有关部口

3、或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被巧阁和借阅。本人授权南昌大学可Ｗ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库化打检索，ｉｉＪＷ采用影印、缩巧或扫描等复制手段保存、汇编本学位论义。村时＇授权北点人方数掘股份有限公司和中国学术期刊（光盘版）电子杂志利；将本巧化．论文收录到《中聞学位论文全文数据库》和《中國优秀博硕±学位论文余文数掘：昨》中全文发表，巧通过网络向社会公众提供信息服务，同意按。章粒＂规化巧巧相关权益。学化论文作者＾游心名（手写）；扬銀矣导师签名（手写）：《別Ｉ期：７《月（■Ｔ円签字円期：兴＇ｔ／年＾巧公Ｈｉ论文题

4、Ｍ化卸爹多豕＞４巧矣《读抑化義送身］＾彩為秦１择掛＾学号刪ｆＷ论文级别博±□硕±「幻／■院／系／皆管批专业度３苑—＿ＩＡ—备ｆＫ：。公片□化密（向長季吞办申谱获戒否方年Ｈ抗公开摘要摘要赭曲霉毒素A（OchratoxinA，OTA）污染广泛，毒性强，主要存在于农产品中，与人类健康有着密切的关系。由于OTA的巨大危害，世界各国加强了对于食品中OTA含量的严格管控。高效液相色谱法和酶联免疫吸附法是常见检测OTA的方法，但是这两种检测技术都存在一定的缺陷，如检测成本高，操作过程繁琐且需专业人士操作等。本研究为了解决这些问题，设计了检

5、测灵敏，快速和操作简便的OTA非标记免疫阻抗传感器。本研究通过Hummer方法制备氧化石墨烯，利用一步电沉积法制备层状结构还原氧化石墨烯/金纳米复合物修饰的玻碳电极，金纳米穿插于石墨烯片层中，将石墨烯架空，有效增大了复合物的比表面积。随后采用EDC/NHS分别将抗OTA驼源性纳米抗体和抗OTA单克隆抗体共价偶联于修饰电极表面，制备了OTA免疫阻抗传感器。1基于OTA的单克隆抗体免疫传感器的研究1.1采用Hummer方法成功制备得到氧化石墨烯，其厚度在1nm左右。通过一步电沉积方法制备层状结构的还原氧化石墨烯/纳米金复合物修饰电极，对沉积条件的进行优化，结果为氧化石墨烯

6、浓度0.5mg/mL，氯金酸的浓度是1mM，循环伏安法沉积圈数为5圈。1.2采用循环伏安法将还原氧化石墨烯/金纳米复合物一步沉积至电极表面，并共价偶联抗OTA单克隆抗体，制备了OTA免疫阻抗传感器。该传感器对OTA的检测线性方程是y=194x+183.1（y是阻抗变化值ΔRet，x是OTA的浓度对数，即log[OTA]），线性范围0.5-20ng/mL，最低检测限为0.35ng/mL，对阴性样品加标回收率75%-101%。2基于OTA的纳米抗体免疫阻抗传感器的研究2.1采用EDC/NHS将抗OTA纳米抗体共价修饰于电极表面，通过优化EDC与NHS的反应浓度比为8:1，

7、反应时间50min，建立的Nb-免疫阻抗传感器，检测线性方程是y=224x+546.5（y是阻抗变化值ΔRet，x是OTA的浓度对数，即log[OTA]）），线性范围0.01-1ng/mL，最低检测限0.005ng/mL，阴性样品加标回收率92%-99%，该传感器检测啤酒样品的结果与ELISA检测结果基本一致。2.2实验结果表明修饰有纳米抗体的传感器灵敏度更好，有望继续深入研究，为以后推广快速检测做好技术储备。关键词：赭曲霉毒素A；氧化石墨烯；纳米复合物；免疫传感器IIAbstractAbstractOchratoxinA(OTA),weidlydi