姜黄素和有氧运动诱导的ampk激活对中老年大鼠骨骼肌细胞自噬的影响初探

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1、硕士学位论文姜黄素和有氧运动诱导的AMPK激活对中老年大鼠骨骼肌细胞自噬的影响初探学科专业运动人体科学学位类别科学学位专业学位研究生姓名陈宗平导师姓名、职称汤长发教授论文编号湖南师范大学学位评定委员会办公室二零一六年五月湖南师范大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中己经注明引用的巧容外，本论文不含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品成果。对本文的＾研究做出重要贡献的个人和集体１，均已在文中乂明确方式标明。本人完全意

2、识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签葦：＾月曰１湖南师范大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属湖南师范大学。同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权湖南师范大学可从将本学位论文的全部或部分巧容编入有关数据库进巧检索，可ｋ义采用影印、缩巧或担描等复制手段保存和汇编本学位论文。作者签毒：曰期＾月曰么，／导师签雀：Ｗ曰期／月曰

3、＼ｉｆ分类号密级学校代码10542学号201302151207姜黄素和有氧运动诱导的AMPK激活对中老年大鼠骨骼肌细胞自噬的影响初探ThepreliminarystudyoneffectsofAMPKactivationinducedbycurcuminandaerobicexerciseonmiddle-agedrats’skeletalmusclecellautophagy研究生姓名陈宗平指导教师姓名、职称汤长发教授学科专业运动人体科学研究方向运动生理学湖南师范大学学位评定委员会办公室二零一六年五月摘要研究

4、目的：通过建立中老年大鼠8周恒定负荷有氧运动以及姜黄素干预模型，检测运动及姜黄素干预后大鼠比目鱼肌AMPK活性变化以及自噬相关基因的表达情况，并运用HE染色去观察大鼠骨骼肌的组织病理学变化，探讨运动结合姜黄素诱导的AMPK活性变化对中老年大鼠骨骼肌细胞自噬的影响。推测运动和姜黄素预防Sarcopenia的作用机理。研究方法：同批次健康雄性21月龄SD大鼠40只，SPF（SpecificpathogenFree，SPF）级动物，分笼饲养。适应性喂养三天，随机分为4组，随机分为空白对照组（BC，n=10）、安静姜黄素组

5、(QC，n=10)、恒定负荷运动+姜黄素组（EC，n=10），恒定负荷运动（NE，n=10）。每组分2笼喂养，每笼5只。运动组大鼠采用跑台运动方式，建立姜黄素结合有氧运动训练干预方式动物实验模型，其中坡度为0，速度15m/min×60min（负荷强度相当于70%VO2max），姜黄素剂量为100mg/kg老鼠体重，每周持续训练5天，共训练8周。训练末次结束后20小时，完整取下大鼠后肢比目鱼肌，计算大鼠比目鱼肌的相对重量（SI），采用Elisa法检测比目鱼肌AMPK活性变化，通过实时荧光定量PCR检测AGT7mRNA

6、、LC3-bmRNA、LAMP-2mRNA的表达情况，并从形态学方面运用HE染色观察大鼠骨骼肌的组织病理学变化。I研究结果：1）各组大鼠体重均显著降低（p<0.01）；实验后，QC组、NE组及EC大鼠体重均显著高于BC组（p<0.01），NE组高于QC组和EC组（p<0.05）。2）与BC组相比较，QC组、NE组以及EC组的SI值都要高，且具有非常显著性差异（P<0.01）；NE组比EC组要高，且具有显著性差异（P<0.05）。3）各组中老年大鼠比目鱼肌出现了不同程度的与衰老相关的组织病理学变化，相对于BC组，QC

7、组、NE组以及EC组的织异常像出现的频数较低，其中NE组表现最好。4）与BC组相比，QC组、NE组及EC组AMPK活性明显提高（P<0.01）；其中，EC组比目鱼肌AMPK活性最高，与NE组、QC组相比，都具有显著性差异（P<0.05）。5）与对照组BC组相比，NE组和EC组AGT7mRNA的表达水平明显要高（P<0.01），QC组AGT7mRNA的表达水平高于BC组（P<0.05），NE与EC组、QC组相比明显提高（P<0.01）。6）与BC组相比，QC组、NE组以及EC组LC3-bmRNA表达水平明显增高（P<

8、0.01），EC组LC3-bmRNA表达水平明显高于QC组和NE组（P<0.01）。7）EC组、QC组以及NE组LAMP-2mRNA的表达量明显高于BC组（P<0.01），且EC组要高于QC组和NE组P<0.05），NE组要高于QC组（P<0.05）。II研究结论：1）8周的恒定负荷有氧运动、姜黄素及两者联合干预都能在一定程度上维持骨骼肌重量，改善骨骼肌组织