有氧耐力运动引起的自噬在骨骼肌建成中的作用

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1、硕士学位论文论文题目有氧耐力运动引起的自噬在骨骼肌建成中的作用研究生姓名蒋丹指导教师姓名秦正红林芳专业名称药理学研究方向神经药理学论文提交日期2013年4月有氧耐力运动引起的自噬在骨骼肌建成中的作用中文摘要有氧耐力运动引起的自噬在骨骼肌建成中的作用中文摘要目的：通过建立一个小鼠有氧运动模型，探讨自噬在运动引起的肌肉建成中的作用及其分子机制。方法：建立雌性小鼠转轮运动模型：6米/分钟，15分钟/次，3次/天（8:00，14:00和20:00），5天/周，共8周。采用自噬激活剂海藻糖（1％水溶液，自由饮用）为阳性对照，自噬抑制剂氯喹（10mg/kg体重，腹腔注射），为阴性对照。We

2、sternblot检测运动对自噬蛋白P62，LC3和CathepsinL，抗凋亡蛋白Bcl-2和前凋亡蛋白Bnip3的影响，TUNEL法检测骨骼肌细胞凋亡的变化情况，HE染色和透射电子显微镜检测骨骼肌，线粒体和自噬体的形态变化。结果：运动显著降低小鼠的体重和腹腔脂肪量，提高自由基的清除能力，促进自噬体的形成，增加蛋白LC3-II，CathepsinL，BCL-2的表达和减少P62和Bnip3的蛋白表达。同时，运动后小鼠骨骼肌中线粒体形态和细胞凋亡情况得到明显改善。运动引起线粒体中细胞色素C的增加，细胞质中细胞色素C的下降，阻止细胞色素C从线粒体释放至细胞质。自噬诱导剂海藻糖激活

3、骨骼肌自噬，对骨骼肌表现出保护作用；抑制剂氯喹阻断自噬流量，破坏肌纤维和线粒体形态。长期有规律运动没有进一步增强海藻糖的作用，但可以部分恢复氯喹对小鼠骨骼肌的有害影响。结论：长期有规律的运动通过维持骨骼肌细胞的自噬在一个较高的生理水平，保护线粒体的形态和功能，从而增强了骨骼肌的建成。关键词：细胞自噬；骨骼肌；线粒体；海藻糖；氯喹作者：蒋丹指导教师：秦正红林芳IAbstractAutophagyplaysaroleinexercise-inducedmusclefitnessAutophagyplaysaroleinexercise-inducedmusclefitnessAbs

4、tractAim：Tostudytheroleofautophagyinbodyresponsestoexercise,whetherautophagyisactivatedbylongtermregularexerciseonthe“justright”levelformuscleestablishmentandhealthmaintenance.Methods:Thefemalemouseexercisemodelwithwheelrunningscheduledwas6m/min,15min/time,3times/d(8:00,14:00,and20:00),5d/we

5、ek,2month.Miceweretreatedby1%aqueoussolutionoftrehaloseasadailydrinkingwaterandintraperitonealinjectionofchloroquine(10mg/kg)beforetrainingin5timesaweek.TheanalysisofWesternblot,TUNEL,HEstainingandtransmissionelectronmicroscopicexaminationwereemployedtoevaluatetheautophagylevelandmusclefiber

6、sstructure.Results:Exerciseincreasedtheantioxidantcapacity,stimulatedtheformationofautophagosomes,increasedLC3-II,CathepsinL,BCL-2andloweredP62andBnip3levels.Meanwhile,themorphologyofmitochondrialandtheapoptosissignificantlyimproved.CytochromeCexpressionwashigherinmitochondrialandlowerincyto

7、plasmafterthetraining.Trehaloseincreasedautophagylevelandprotectthemusclefibersfromapoptosis.Chloroquineblockedautophagyfluxandcausedtoxicityonskeletalmuscles.Exercisecouldrecovertheharmfuleffectsofchloroquineonskeletalmuscles.Conclusion:Autophagyp