有氧运动对EPCs诱导大鼠心肌微血管新生能力的影响

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1、湖南师范大学硕士学位论文有氧运动对EPCs诱导大鼠心肌微血管新生能力的影响姓名：龚晓明申请学位级别：硕士专业：运动人体科学指导教师：瞿树林;郑澜20100501摘要目的：研究有氧运动对EPCs诱导大鼠心肌微血管新生能力的影响。方法：健康两月龄雄性SD大鼠20只，按体重随机分为两组，即空白对照组和有氧运动组。采用递增负荷跑台训练建立有氧运动模型，每周训练6天，为期8周。方案结束后12h提取大鼠外周血和骨髓，运用密度梯度离心法分离得到单个核细胞，以EGM．2培养诱导其分化获取内皮祖细胞，通过双荧光染色法观察

2、细胞对乙酰化低密度脂蛋白的摄取和与荆豆凝集素1的结合，并结合形态学特征鉴定内皮祖细胞，倒置显微镜下计数贴壁细胞数量以反映细胞增殖情况和黏附能力；制备心室肌标本，采用免疫组织化学方法检测CD34阳性细胞以定位心肌组织微血管，免疫组织化学方法检测微血管上ACl33阳性蛋白表达，显微图像分析系统对CD34和ACl33阳性表达定量分析，流式细胞术检测外周血单个核细胞CD34+、CD34+／Flk-1+细胞比例。结果：(1)CD34较好地标记了心肌组织微血管，对照组大鼠心肌组织微血管内皮上有微弱的ACl33蛋白表

3、达，有氧运动组大鼠心肌组织微血管内皮上有较多的CD34(P0．05)；(3)细胞双荧光染色呈双阳性，表明所培养的贴壁细胞为内皮祖细胞；(4)无论是第48小时还是第7天，有氧运动组外周血和骨髓来源的内皮祖细胞数量较对照组都更多(P

4、胞数量都发生了增殖(P

5、强；(4)有氧运动促进大鼠心肌微血管新生的机制可能是有氧运动促进了大鼠骨髓中内皮祖细胞的动员和增殖，从而释放入血，使循环中内皮祖细胞数量增多、粘附能力增强，并归巢于大鼠心肌微血管壁后，参与诱导微血管的新生。·关键词：有氧运动；内皮祖细胞：心肌组织；血管新生；骨髓；细胞培养ⅡABSTRACTObjectiveEndothelialprogenitorcellsderivedfrombonemarrowandperipheralbloodofmalerats，whichviaaerobicexercise，

6、wereculturedinvitro．Then，weinvestigatedthestatusofproliferativeandadherentcapacityofendothelialprogenitorcellstounderstandthechangeandthemechanismonangiogenesisincardiactissueofrats．MethodThesubjectswere20maleSprague—Dawleyratsinage2months，whichrandomlya

7、ndaveragelydividedinto2groups，suchascontrolgroupandaerobicsgroup．Incrementaltreadmillexercisewiththeintensityofaerobicexercisewasregardedasaerobicsmodel，andtrainingoneadayfromMondaytoSaturdaytill8weeks．Mononuclearcellsfrombonemarrowandperipheralbloodwere

8、obtmnedbydensitygradientcentrifugation12hoursaftertheschemehasendedup．ThecellsweresuspendedinconditionedmediumEGM一2forculturinginvitro．TheirphenotypeswereconfirmedbyuptakeofacetylatedLDLandbindingoffluoresceinisothiocyanat