心复康对心肌梗塞后大鼠心肌血管新生的影响

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1、心复康对心肌梗塞后大鼠心肌血管新生的影响郭茂娟，范英昌，徐秀梅，赵旭【摘要】　　目的观察中药心复康对心肌梗塞后大鼠心肌血管新生的影响，探讨其对缺血心肌可能的保护机制。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组和中剂量组，每组12只。模型组及中药组采用冠状动脉结扎法制作心肌梗塞模型。中药高剂量组（81g·kg-1·d-1）和中剂量组(40.5g·kg-1·d-1)给予中药心复康水煎剂灌胃，假手术组和模型组每天等量生理盐水灌胃。给药4周后处死大鼠，通过免疫组化方法，测定血管内皮细胞粘附分子CD31的表达以了解缺血心肌血管新生情况，检测血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子（b

2、FGF）的蛋白表达情况。结果中药高剂量组CD31的表达明显高于模型组，中药组VEGF及bFGF的表达量均明显高于模型组。结论心复康通过上调VEGF和bFGF的表达，能够有效促进血管新生，改善缺血心脏功能，挽救缺血的心肌。【关键词】心复康；心肌梗塞；血管新生　　Abstract：ObjectiveTostudytheeffectofXinfukangonangiogenesisaftermyocardialinfarction(MI)inrats.MethodsMyocardialinfarctionalerats.Tlydividedintomyocardialinfarctioncontr

3、olgroup,sham-operatedgroup,XinkukangmiddledosegroupandXinfukanghighdosegroup.After4munohistochemistry.Resultsparedoperated,XinfukanghighdosegroupcouldenhanceexpressionofCD31,VEGF,bFGF.ConclusionXinfukangcanenhanceangiogenesisafterMIinratsandimproveischemiacardiacfunction.　　KeyageProPlus6.0美国)。　　1.2

4、动物模型的建立、分组和处理实验动物用乙醚全身麻醉后，进行常规被皮消毒，于左胸部第四肋间切开皮肤，钝性分离肌肉压右胸，挤出心脏，于肺动脉圆锥与左心耳间、距左冠脉起源2～3mm处，用带0号丝线弯针结扎冠状动脉，通过观察左室表面局部发绀和心电图S-T段呈单向曲线，标志结扎成功〔2,3〕。随后将心脏送回胸腔，排出胸腔内空气，缝合切口，局部予青霉素注射预防感染，假手术组穿线但不结扎。除去在术中死亡的大鼠，手术后存活的大鼠随机分组，分为高剂量心复康组、中剂量心复康组，模型组及假手术组，每组可分得12只。术后每天定时灌胃，高剂量心复康组给予心复康81g·kg-1·d-1（相当于成人临床剂量10倍的浓度）和

5、中剂量心复康组给予心复康40.5g·kg-1·d-1（相当于成人临床剂量5倍的浓度），假手术组和模型组给予等量的生理盐水。　　1.3标本留取和处理28d后颈椎脱臼处死动物，取出心脏并用冰生理盐水洗净，剪除大血管及附着的结缔组织，称重放入10%中性甲醛内,用于石蜡包埋切片。　　1.4指标检测　　1.4.1计数新生血管数CD31CD31是为内皮细胞的特异性功能标志，经DAB染色可特异性着色血管内皮细胞，通过观察CD31表达可判定新生血管的情况。血管内皮细胞均被染成黄、棕色。低倍光学显微镜(100×)下找到血管密度较大区域，再转到高倍视野(400×)下精确计数单位面积微血管数量。随机测定8个视野，

6、取其均值作为测定值。　　1.4.2用病理图像分析仪测VEGF和bFGF平均光密度指标判定标准：心肌组织中VEGF表达：以心肌细胞胞浆内或细胞外基质出现棕黄色颗粒为阳性判定标准。bFGF的表达：阳性信号存在于心肌梗塞灶、边缘区内尚存的心肌细胞、血管内皮细胞及骨髓干细胞内，镜下呈棕黄色为阳性细胞。免疫组化阳性反应强度，用图像分析系统进行定量分析。阳性反应强度用IOD值表示，IOD值=阳性反应面积/平均光密度。　　1.5统计学方法　　所有数据以±s表示,数据应用SPSS11.5软件包单因素ANOVA(方差分析)方法进行差异显著性检验。P0.05有统计学意义。　　2结果　　2.1心复康对血管新生数目

7、CD31表达的影响模型组CD31阳性细胞数量较假手术组表达升高，高剂量心复康组CD31阳细胞数量高于模型组，且有统计学差异，中剂量心复康组CD31阳性细胞数较假手术组升高，但与模型组比较，无统计学差异。结果见表1。　　2.2心复康对心肌组织VEGF和bFGF表达的影响与假手术组比较，模型组VEGF和bFGF表达值均升高，有统计学意义；与模型组比较，中药组VEGF的表达均升高，且高剂量组表达要高于中剂量心复康组