基于磁性分离技术的化学发光适体传感器检测赭曲霉毒素a

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1、分类号：密级：UDC：学号：417414714063南昌大学专业学位研究生学位论文基于磁性分离技术的化学发光适体传感器检测赭曲霉毒素AChemiluminescentAptasensorsBasedonMagneticSeparationTechnologyforDetectionofOchratoxinA童丽培养单位（院、系）：资源环境与化工学院指导教师姓名、职称：严喜鸾副教授专业学位种类：工程硕士专业领域名称：化学工程论文答辩日期：2016年5月30日答辩委员会主席：评阅人：2016年月日学位论文独创性声明一、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进

2、行的研究王作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得盧畳丈堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料一同工作的同志对本研究所做的任何贡。与我献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名（手写）：签字日期；扣年／月日＾二、学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可Ｗ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可

3、Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权北京万方数据股份有限公司和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕±学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务，同意按＂＂章程规定享受相关权益。学位论文作者签名（手写导师签名：（手写）签字曰期：年＾月曰签字曰期：办／左年《月曰案＾论文题目墓和結，作妃尤和怎坐古店妳戚聲龄和ｙ＾７考琴襄Ａ吁节叫名ｉ号级别「品ｂ□而±圓＾＿＿書前ｆ院／系／所《Ｔ吊苗為知＞走捧１心Ｉ／化《义婚Ｅ＿ｍａｉｌ备□注公：开□保密

4、（向校学位办申请获批准为＂保密＂，年＿＿＿月后公开）摘要摘要赭曲霉毒素A（OTA）是一种具有很强毒性的真菌毒素，其毒性在真菌毒素家族中位列第二位，仅次于黄曲霉毒素。OTA在自然界分布广泛，不仅污染谷物粮食，还严重污染动物性食品，对人类构成极大的威胁。鉴于食品安全问题关乎整个社会的安危，应当引起全世界的高度关注，因此建立OTA的高灵敏简便快速分析方法越发受到科研人员的重视。本论文基于不同的传感模式和化学发光机理，构建了几种不同的适体传感器，从而实现了OTA的化学发光检测。且这几种OTA适体传感器均以磁性微球作为分离和固定载体，实现传感器的均相反应异相分离。整篇论文内容可分为如下三个部分

5、：第一部分基于OTA适体链上的鸟嘌呤（G）碱基与化学发光试剂苯甲酰甲醛（PG）的瞬时衍生化反应产生化学发光的原理，以OTA适体为检测探针，建立了一种无标记适体传感器，采用化学发光法（CL）实现了OTA的定量分析。随着待测OTA浓度的增大，传感器CL值逐渐减小，对比未加入OTA的空白组，引起的CL变量（∆CL）逐渐增大。优化实验条件下，OTA浓度在0.1~50ng/mL2范围内，其对数值（X）与∆CL（Y）呈现较好线性关系（r=0.9952），最低检出限为0.1ng/mL。对红酒样品进行加标回收，回收率在103.3%~112.5%之间，相对标准偏差（RSD）在4.2%~7.2%之间（n=3）

6、。另外，结果显示该无标记适体传感器化学发光检测OTA具有较高特异性。第二部分以金纳米粒子作为标记物，建立了一种适体传感器，利用纳米金催化鲁米诺体系产生化学发光的机制，实现OTA的定量分析。本法以OTA适体作为固定相，利用OTA与纳米金标记的报告序列竞争结合磁性微球表面OTA适体，从而得到OTA浓度与CL信号的呈一定相关性。最优实验条件下，OTA浓度在0.01~20ng/mL范围内，其对数值（X）与∆CL（Y）呈良好线性关系2（r=0.9922），最低检出限为0.01ng/mL。加标回收率在104.1%~112.7%之间，RSD值在5.9%~8.7%之间（n=3）。经考察，采用纳米金标记的适

7、体传感器化学发光检测OTA具有良好特异性。第三部分沿袭第二部分的传感原理，仅以辣根过氧化物酶（HRP）代替纳米金作为标记物，利用HRP催化鲁米诺体系产生化学发光的原理，从而定量分析OTA。最优实验条件下，OTA浓度在0.01~50ng/mL范围内，其对数值（X）与I摘要2∆CL（Y）线性相关（r=0.9898），最低检出限为0.01ng/mL。加标回收率在98.5%~109.3%之间，RSD值在5.2%~7.7%之间（n