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时间:2019-03-16
《巴沙鱼皮胶原蛋白的理化性质及其止血应用研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、分类号:______________密级:_________________学校代码:10414学号:2012010700硕士研究生学位论文巴沙鱼皮胶原蛋白的理化性质及其止血应用研究Studiesontheproperties,compositionandhemostaticapplicationofcollagenfromPangasisushaniltoaskin龚明院所:生命科学学院导师姓名:邹峥峰教授专业学位类别:生物学专业领域:生物资源学二〇一五年六月独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方
2、外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:签字日期:年月日摘要目的分析巴沙鱼皮的营养成分,研究巴沙鱼皮胶原蛋白的提取方法、理化特性及生理特性,为将巴沙鱼皮胶原蛋白应用于医用止血海绵的制备提供理论依据。方法分别采用常压风干法、中国药典方法(2010年版二部附录VIIIN)、索氏提取法和半微量凯氏定氮法依次测定巴沙鱼皮水分含量、灰分含量、粗脂肪含量和粗蛋白含量;分别用酸法和酶法提取巴沙鱼皮胶原蛋白;采用SDS-PAGE凝胶电泳和HP
3、LC分析比较不同胶原蛋白的分子量和氨基酸组成;用粘度测定法测定巴沙鱼皮的变性温度;对不同来源的胶原蛋白作差热分析比较其热稳定性;分别测定胶原海绵吸水性、干燥失重率及水溶解性观察其物理性能;酸碱度测定及重金属含量测定观察其作为止血海绵的可行性,通过兔耳止血及肝脏止血实验探究巴沙鱼皮胶原海绵作为止血材料的有效性。结果巴沙鱼皮水分含量为66.14%,灰分含量为0.76%,分别对巴沙鱼皮原材料、经过一次处理和经过两次处理的巴沙鱼皮粗脂肪含量进行测定,结果分别为18.20%、9.6%、7.46%,粗蛋白含量测定结果分别为87.29%、90.73%、95.20%;巴沙鱼皮用ASC提取率为58.20
4、%,用猪粘膜胃蛋白酶酶解法提取时胶原蛋白的提取率为22.0%;对多种不同来源胶原蛋白电泳测定结果及氨基酸测定的结果显示,几种来源胶原主要为I型胶原;巴沙鱼皮胶原在几种材料中脯氨酸和羟脯氨酸含量最高,胶原蛋白含量最为丰富;粘度测定结果表明巴沙鱼皮未经任何交联和经过EDC交联后的变性温度均为34℃左右,而经过120℃热交联后的巴沙鱼皮变性温度为28℃左右;通过差热分析表明巴沙鱼皮胶原具有很好的耐热性;兔耳止血及肝脏止血实验表明巴沙鱼皮胶原蛋白具有较好的止血效果。上述研究结果表明巴沙鱼皮胶原蛋白具备开发成为止血材料的特性。结论巴沙鱼皮胶原蛋白含量非常丰富,以其为原料制备的海绵具有优异的止血效
5、果,可进一步研究开发成为临床医用止血材料。关键词:巴沙鱼皮;胶原蛋白;特性研究;止血海绵IAbstractObjectiveAnalysisofPangasisushaniltoaskinnutrition,extractedcollagenfromthefishskinanditsphysicalproperties,chemicalpropertiesanalysis,andphysiologicalcharacteristicswerestudied.MethodsRespectivelybyatmosphericpressuredryinghairmoisturedetermi
6、nation,accordingtoChinesepharmacopoeia2010editionofannexVIIINdeterminationofashcontent,soxletextractionmethodtodeterminatecrudefatcontent,semi-microkjeldahlnitrogendeterminationmethodfordeterminationofproteincontent.Acid-solublecollagen(ASC)andpepsin-solublecollagen(PSC)fromfreshPangasisushanilt
7、oaskin;UsingSDS-pagegelelectrophoresisandHPLCanalysistocomparedifferentmolecularweightandaminoacidcompositionofcollagen;UseviscometrytodeterminePangasisushaniltoaskindenaturationtemperatureandcomparetoothersourcesofcollagen;
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