姜黄素对高糖诱导的h9c2心肌细胞炎症的保护作用及机制研究

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1、分类号：密级：UDC：学号：416522612653南昌大学专业学位研究生学位论文姜黄素对高糖诱导的H9C2心肌细胞炎症的保护作用及机制研究ProtectiveEffectsofCurcuminonHighGlucose-InducedInflammationinH9C2CardiomyocytesandItsMechanism王迎春培养单位（院、系）：南昌大学第一附属医院指导教师姓名、职称：王云开教授主任医师专业学位种类：临床医学专业领域名称：内科学（心血管内科）论文答辩日期：2015年6月答辩委员会主席：程晓曙评阅人：苏海洪葵2015年6月一一、、、

2、学学学位位位论论论文文文独独独创创创性性性声声声明明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名（手写）：签字日期：年月日二二、、、学学学位位位论论论文文文版版版权权权使使使用用用授授授权权权书书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校有权保留并向国家

3、有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权北京万方数据股份有限公司和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务，同意按“章程”规定享受相关权益。学位论文作者签名（手写）：导师签名（手写）：签字日期：年月日签字日期：年月日论文题目姓名学号论文级别博士□硕士□院/系/所专业E_mail备注：□

4、公开□保密（向校学位办申请获批准为“保密”，年月后公开）I摘要摘要目的：1、观察高糖对H9C2心肌细胞生物活性的影响。2、观察姜黄素对高糖诱导的H9C2心肌细胞的生物活性、炎症反应的影响。3、探讨姜黄素抑制高糖诱导的H9C2心肌细胞炎症反应的机制。方法：1、体外正常糖培养H9C2心肌细胞，再分别用高糖、姜黄素、肝X激动剂/抑制剂、TLR抑制剂、PP2A抑制剂进行干预。2、实验分组：①Control组：正常对照组，用正常糖培养基（5.5mmol/L）培养H9C2细胞；②HG组：阳性对照组，用高糖培养基（33mmol/L）培养H9C2细胞；③HG+T0901

5、317组：对HG组用肝X激动剂（T0901317终浓度20μmol/L）进行干预；④HG+TAK-242组：对HG组用TLR抑制剂（TAK-242终浓度100nmol/L）进行干预；⑤HG+Curcumin组：对HG组用姜黄素（Curcumin终浓度10μmol/L）进行干预；⑥HG+5CPPSS-50组：对HG组用肝X抑制剂（5CPPSS-50终浓度15μmol/L）进行干预；⑦HG+5CPPSS-50+Curcumin组：在HG+5CPPSS-50组的基础上加用Curcumin进行干预；⑧HG+Okadaicacid组：对HG组用PP2A抑制剂（Ok

6、adaicacid终浓度20nmol/L）进行干预；⑨HG+Okadaicacid+Curcumin组：在HG+Okadaicacid组的基础上加用Curcumin进行干预。3、相应组中加入相应药物干预72h后，用CCK-8检测各组H9C2心肌细胞的生长状况；ELISA试剂盒测各组炎症因子（IL6、TNFα、MCP1）分泌量；同时应用qRT-PCR检测各组LXRα、IRAK4、PP2AcmRNA水平；Westernblot检测各组NF-κBp65(总量和核内)、LXRα、IRAK4、p-PP2Ac蛋白的表达并比较。结果：1、CCK-8检测各组H9C2心肌

7、细胞的生长状况结果显示：高糖可使细胞增殖活力下降，LXRs激动剂、TLR抑制剂、姜黄素可以减轻高糖对H9C2心肌细胞增殖活力的抑制，而LXRs抑制剂或PP2A抑制剂干预后细胞增殖活力抑制加剧。在LXRs抑制剂或PP2A抑制剂干预的基础上使用姜黄素不能改善高糖对II摘要H9C2心肌细胞增殖活力的抑制。2、ELISA法检测各组细胞上清中炎症因子（IL6、TNFα、MCP1）的分泌量，结果表明：高糖作用下细胞培养上清中炎症因子含量明显增高（P<0.05）。T0901317、TAK-242、Curcumin干预后炎症因子分泌量减少（P<0.05）。5CPPSS-

8、50或Okadaicacid加剧炎症因子释放（P<0.05）。相对HG+Curc