壳聚糖席夫碱合成及其对灰霉菌抑菌机制

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1、中图分类号：R15单位代码：10660UDC：613.2学号：10660S120112学科专业代码：〗00403密级：公幵贵阳医学院2015届硕士学位论文(科学学位）壳聚糖席夫碱合成及其对灰霉菌抑菌机制SynthesisofChitosanSchiff-baseanditsantiflmgalmechanismonBotiytiscinerea研究生：江玺导师：黄亚勘教授孙晓红教授徐红教授年级：2012级专业：营养与食品卫生学贵阳医学院学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的揞导下，独立

2、进行研究工作所取得的成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。除与外单位合作项目将予以明确方式规定外，本研究已发表与未发表成果的知识产权均归属贵阳医学院。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名（手写）：江杳导师签名（手写）：^cfr年弋月j曰年f月>日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件

3、和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权贵阳医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以釆用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于（请在以下相应方框内打“：1、保密□，在_年解密后适用本授权书。2、不保密缸。作者签名（手写）：:rr考导师签名（手写）：2SIZ年月日分，广年夕月义中图分类号：R15单位代码：10660UDC：613.2学号：10660S120112学科专业代码：100403密级：公开贵阳医学院2015届硕士学位论文（科学学位）壳聚糖席夫碱合成及

4、其对灰霉菌抑菌机制SynthesisofChitosanSchiff-baseanditsantifungalmechanismonBotrytiscinerea论文作者：江玺指导教师：黄亚励教授孙晓红教授徐红教授申请学位：医学硕士培养单位：公共卫生学院学科专业：营养与食品卫生学研究方向：食品保鲜剂的开发研究应用研究起止日期：2013年9月至2015年1月论文评阅人：盲评答辩委员会主席：汪思顺主任医师论文答辩日期：2015年5月22日二〇一五年五月壳聚糖席夫碱合成及其对灰霉菌抑菌机制专业：营养与食品卫生学

5、硕士研究生：江玺导师：黄亚励孙晓红徐红【摘要】目的：研究化学合成的四种壳聚糖席夫碱(CTS-Sal、CTS-2Hy、CTS-Val、CTS-O-val)对灰霉菌的抑菌活性，及其中抑菌活性最佳者的抑菌机制。方法:采用红外光谱（FT-IR）和紫外分光光谱（UV）对席夫碱结构进行表征；通过微量液体稀释法和真菌菌丝生长速率法测定了CTS（原料）和四种席夫碱对灰霉菌的最小抑菌浓度（MIC）和半数有效浓度（EC50）；席夫碱（抑菌活性最佳者）处理灰霉菌后，通过对菌丝显微结构观察以及菌体细胞细胞壁、细胞膜、细胞核三个层

6、次的生理生化指标的测定来研究其抑菌机制；数据采用SPSS17.0统计软件包进行数据整理、录入、分析；计量资料均使用（XS）来表示；多组资料间比较采用重复测量的两因素方差分析（MANOVAofrepeatedmeasuring）及简单效应分析（simpleeffectanalysis）.结果：1.红外图谱和紫外图谱分析表明四种醛已经结合于CTS载体；2.与CTS（对照组）相比，四种席夫碱对灰霉菌均有明显抑制作用，其中CTS-2Hy的MIC值和EC50值均最小，分别为1184.49和724.44μg/mL；

7、3.经过CTS-2Hy处理后的灰霉菌在透射电镜下观察，发现菌体细胞的细胞壁模糊不清甚至严重缺失，细胞壁完整性被破坏、细胞膜亦发生断裂，细胞核无明显变化，而CTS处理组细胞结构完整；相同的处理时间组CTS-2Hy组的几丁质含量均低于CTS组（P＜0.01）；4.12h、16h、20h时CTS-2Hy组电导率均高于CTS组（P＜0.01）；20h时CTS-2Hy可溶性蛋白渗透量高于CTS组（P＜0.01）；8h、12h、16h、20h时CTS-2Hy可溶性还原糖含量均高于CTS组（P＜0.01）；5.4h、8

8、h、16h、64h时CTS-2Hy组β-1,3葡聚糖合成酶活性低于CTS组（P＜0.01）；16h和32h时CTS-2Hy组几丁质酶活性高于CTS组（P＜0.01）；6.对应相同时间组，CTS-2Hy组过氧化氢酶活性均低于CTS组（P＜0.01）；7.CTS-2Hy和CTS不同浓度分别作用于灰霉菌后，基因组DNA含量的差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：1.四种醛与壳聚糖均发生了席夫碱反应；四种席夫碱中，CTS-2Hy对灰