基于适体的有机磷农药简易灵敏检测方法的建立

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1、De学校代码：10385分类号：研究生学号：1200216025密级：基于适体的有机磷农药简易灵敏检测方法的建立Theestablishmentofasimpleandsensitiveaptamer-basedmethodfordetectionoforganophosphoruspesticide作者姓名：赵津指导教师：林俊生学科：生物化学与分子生物学研究方向：适体传感器所在学院：生物医学学院论文提交日期：二零一五年四月十日学位论文独创性声明本人声明兹呈交的学位论文是本人在导师指导下完成的研究成果。论文写作中不包含其他人已经发表或撰写过的研究内容，如参考他人

2、或集体的科研成果，均在论文中以明确的方式说明。本人依法享有和承担由此论文所产生的权利和责任。论文作者签名：签名日期：学位论文版权使用授权声明本人同意授权华侨大学有权保留并向国家机关或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许学位论文被查阅和借阅。本人授权华侨大学可以将本学位论文的全部内容或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。论文作者签名：指导教师签名：签名日期：签名日期：摘要摘要农药残留问题是影响我国食品质量与安全的重点问题之一。它不仅严重了阻碍了我国对外贸易经济的发展，而且还严重危害着人类的生命安全。在农药的使用

3、和残留中以有机磷农药的量最大。目前农药残留的检测方法很多，包括高效液相色谱法、气相色谱法、毛细管电泳法等理化分析方法和酶生物传感器、免疫生物传感器等生物检测法。迄今，这些方法对操作繁琐，设备的要求高。本课题就是针对这种情况，建立了一种高特异性的简易检测方法。适体（Aptamer）是一段单链寡核苷酸片段或多肽，可以是RNA和DNA，也可以是多肽。可以结合如氨基酸、蛋白质、无机离子或药物等目标分子。适体具有高特异性、高亲和力、易合成、低成本、稳定性好等特点，使得适体在很多方面得到了应用，比如适体能作为药物治疗疾病，能作为运输工具在体内输送药物，能用于生物标志物、小分

4、子物质、病原体等的检测，适体还可用于生物成像等。本课题以有机磷农药残留检测为切入点，利用适体建立了一种简易灵敏的有机磷农药丙溴磷残留的检测方法。根据适体和金纳米材料的特点，本课题制备出了一种光学适体传感器进行农药检测，并且对该检测方法的灵敏度、特异性和稳定性进行分析。最终得到了一种能够检测到6nM水平、特异性强和稳定性好的简易灵敏检测方法，该方法耗时短，耗费低，易推广。并且在实际蔬菜农药残留的检测中，检测水平达到了10-7M。该实验数据为适体在农药残留检测方面的应用提供实验基础，同时也为快速检测技术的发展提供理论基础。关键词：农药残留适体金纳米材料适体传感器IA

5、bstractAbstractPesticideresidueisoneofthekeyissuesaffectingfoodqualityandsafetyinChina.ItdoesnotonlyseriouslyhindertheeconomicdevelopmentofChina'sforeigntrade,butalsothreatenedhumanhealthy.Theorganophosphoruspesticidesarethelargestamountoftheuseofpesticidesandresidues.Currently,manyd

6、etectionmethodsofpesticideresidueshavebeenemployed,includingdifferentphysicochemicalanalysismethods,suchashighperformanceliquidchromatography(HPLC),capillaryelectrophoresis(CE),gaschromatography(GC),andbiologicaldetectionmethods,suchasenzymebiosensorandimmuno-biosensor.However,uptoda

7、te,allofthosemethodsrequireeithercomplicateprotocolsorexpensiveequipment.Envisagingthissituation,thisstudyaimedtoestablishasimple,rapid,highspecificitymethodfordetectionoforganophosphorous.Aptamersareartificialnucleicacidfragments,suchasribonucleicacid(RNA)andsingle-stranddeoxyribonu

8、cleicacid(ss