利用基因沉默验证大丽轮枝菌糖代谢相关基因的致病力

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1、密级：论文编号：中囯农业科学院学位论文利用基因沉默验证大丽轮枝菌糖代谢相关基因的致病力PathogenicityVerificationofGlycometabolismRelatedGenesinVerticilliumdahliaebyusingGeneSilencingMethod硕士研究生：赵玉兰指导教师.•程红梅研究员申请学位类别：理学硕士专业：生物化学与分子生物学研究方向：植物分子生物学培养单位：生物技术研究所研究生院2015年6月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地

2、方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：〕〇丨&年（月f日关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，即：中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名：^毛爻时间：月f曰导师签名:吋间：l

3、ep年6月f曰中国农业科学院j硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目利用基因沉默验证大丽轮枝菌糖代谢相关基因的致病力生牧)^七学:与•植物基因工论文作者研究方向赵玉兰^^程指导教师程红梅研宂员培养单位（研宄所）生物技术研宄所硕（博）姓名职称单位专业签名导师硕导口盲审博导口评硕导口阅盲审博导口人硕导口盲审博导口'&硕导口中国科学院遗传发育生物化学与陈受宜研宄员主博导口研宄所分子生物学席硕导口中国农业科学院生物生物化学与郭三堆研宂员iy博导口技术研究所分子生物学硕导口中国林业科学院林业生物化学与齐力旺研宂员博导口研宄所分子生物学答硕导口作物遗传育华金平教授中国

4、农大农学院博导口种辩顼导口中国农业科学院生物生物化学与吴燕民研宂员博导口技术研宄所分子生物学委硕导口中国农业科学院生物生物化学与李为民研究员博导口技术研宄所分子生物学硕导口中国农业科学院生物生物化学与张锐研究员r博导口技术研宄所分子生物学im硕导口s博导口会议记录（秘书）孙占敏2015.05.2913:30中国农业科学院生物技术研宄所216会议室论文答辩时间地点-----------------------------------密级:论文编号:中国农业科学院学位论文利用基因沉默验证大丽轮枝菌糖代谢相关基因的致病力PathogenicityVerification

5、ofGlycometabolismRelatedGenesinVerticilliumdahliaebyusingGeneSilencingMethod硕士研究生：赵玉兰指导教师：程红梅研究员申请学位类别：理学硕士专业：生物化学与分子生物学研究方向：植物分子生物学培养单位：生物技术研究所研究生院2015年6月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesMasterDissertationPathogenicityVerificationofGlycometabolismRelatedGenesinVerticill

6、iumdahliaebyusingGeneSilencingMethodM.S.Candidate：YulanZhaoSupervisor：HongmeiChengDegree：BiochemistryandMolecularBiologySpecialty:PlantMolecularBiologyJune2015摘要大丽轮枝菌是一种土传性维管束病原真菌，影响多种经济作物的产量和质量，是棉花黄萎病的病原真菌。由于大丽轮枝菌具有稳定存在的微菌核结构以及多变的生理小种，所以其引起的棉花黄萎病至今难以防治。大丽轮枝菌全基因组序列信息的公开为研究大丽轮枝菌致病相关的关键

7、基因提供了必要的数据支持，这也为在分子水平和细胞水平更好的理解大丽轮枝菌与宿主植物的互作机制及致病机理提供了可能性。本实验室对已有的大丽轮枝菌数据库提供的VdLs17全基因组序列进行初步的生物信息学分析，根据基因功能进一步划分为：毒素蛋白相关、糖代谢相关和能量代谢相关等不同种类的基因，构建了90多个VIGS载体，并利用寄主诱导的基因沉默（HIGS）技术进行初步的表型筛选，获得约20个表型良好的基因。本研究利用HIGS技术筛选和验证了大丽轮枝菌糖代谢相关的5个基因VdEG1（外切葡聚糖酶，基因库编号VDAG_02898.1）、VdENG1（内切葡糖酶，基因库编号VD

8、AG_10