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《从天然药物中提取醛糖还原酶抑制剂及其活性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、摘要随着生活水平的提高、人口老龄化生活方式的改变,糖尿病发病率逐年增加。全世界有糖尿病患者3.82亿,我国的糖尿病患者已达1.14亿。糖尿病造成的死亡,已居当今世界死亡原因的第5位。目前全球每年约有320万人死于糖尿病诱发的并发症,在大部分发展中国家,已经成为多数国家人口死亡的主要死因之一。糖尿病及糖尿病并发症（diabeticcomplications,DCC）的治疗一直是医学研究的热点和难点。随着糖尿病患者病情的发展，患者易患糖尿病慢性并发症，约73.2%的糖尿病患者伴有一种或多种糖尿病并发症，而且晚期糖尿病并发症病人生存率非常低。研究发现多元醇代谢通路
2、（polyolpathway，PP）的激活与糖尿病慢性并发症有关，醛糖还原酶（aldosereductase，AR）是体内糖代谢多元醇通路的关键酶，目前临床上醛糖还原酶抑制剂是预防、延缓和治疗糖尿病并发症的首选药物之一。但由于此类药物副作用大，限制了其临床使用，迫切需要开发新的更安全有效醛糖还原酶抑制剂。同时又由于醛糖还原酶价格昂贵，不利于建立一种高通量筛选醛糖还原酶抑制剂的模型。天然药物是指植物，动物，矿物等自然界中存在的有药理活性的天然产物。近年来国内外医药市场对天然药物需求的日益增大，呈现出快速增长的势头，对其进行研究已经成为当今非常热门的课题。天然药
3、物的应用在中国有悠久的历史，与传统化学合成药物相比，天然药物更易获得，毒副作用小，成本更低，越来越受到人们的青睐，成为人们防病治病的优先选择。本课题从天然药物中筛选醛糖还原酶抑制剂，并对其活性进行初步研究。通过检测醛糖还原酶关键辅酶NADPH的吸光度变化来衡量醛糖还原酶抑制程度，筛选出的对醛糖还原酶抑制效果突出的药物通过晶状体模型和肾小球系膜细胞模型再次筛选，晶状体和肾小球是糖尿病并发症影响较典型的部位，通过这两个部位的生理生化指标能够更好的反映天然药物对醛糖还原酶的抑制活性。本实验初步建立用于筛选具有抑制醛糖还原酶活性的天然化合物的药物模型，以多个角度从天
4、然药物中筛选抑制糖尿病并发症的药物，为糖尿病及其并发症寻找新的治疗药物，特别是为体外筛选新的具有天然药物活性的醛糖还原酶抑制剂提供方法和依据。I本实验分为四部分：1.从新鲜牛眼晶状体中提取醛糖还原酶，在磷酸盐缓冲液中手动研磨，梯度盐析，离心，透析，得到粗酶，通过测定酶的活力和蛋白浓度测得酶的比活力为2.93U/mg，适合进行下一步实验。2.选取80种天然药物，水提有效成分，从中筛选针对醛糖还原酶的抑制剂，根据IC50值筛选得到红景天，鸦胆子，青果，鹿衍草，僵蚕，麦冬等效果较好的药物，通过高糖晶状体模型和高糖肾小球系膜细胞（HBZY-1)模型，测得可溶性蛋白和
5、各种抗氧化指标，综合地评价药物对醛糖还原酶导致的糖尿病并发症的治疗作用。3.与药物共同培养的高糖晶状体通过石蜡切片直观地观察药物对于机体的积极作用。上述药物对于高糖损伤后的晶状体均有一定程度的恢复作用。4.高糖和氧化损伤会导致晚期糖基化终产物（AGEs）的产生，AGEs会直接导致糖尿病的各种并发症，实验最后对抑制醛糖还原酶IC50值较低的药物红景天，鸦胆子，青果，鹿衍草进行讨论，上述药物均对晚期糖基化终产物的抑制效果较好，与醛糖还原酶抑制剂的结果相符。关键词:2型糖尿病，醛糖还原酶，天然药物，筛选，抑制剂IIAbstractNaturalproductsre
6、fertoplants,animals,mineralsandothernaturallyoccurringpharmacologicallyactivenaturalproducts.ApplicationofnaturalproductshasalonghistoryinChina,andcomparedtosyntheticdrugs,naturalproductsaremoreaccessibleandlesscostly.Alongtimeagoitwasusedasanaturalproducttotreatdiabetes,andhasabro
7、adapplicationbase.Aldosereductaseenzymeisasignofdiabetescomplications,whichisactiveinhighglucoseconditions,openingpolyolpathway,catalyzedconversionofglucoseintosorbitol,sorbitolaccumulationincellscauseavarietyofcomplications.Sothealdosereductaseisanaturaltargetfordrugscreening,hopi
8、ngtogetsomeofthealdoseredu
