tgf-β1诱导食管鳞状细胞癌细胞te13发生上皮间质转化及其参与放射抗性的分子机制

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1、授予单位代码10089学号或申请号20122181HebeiMedicalUniversity硕士学位论文科学学位TGF-pl诱导食管鳞状细胞癌细胞TE13发生上皮间质转化及其参与放射抗性的分子机制研究生：张亚芳导师：薛晓英教授专业：肿瘤学二级学院：第二医院2015年3月河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师（或指导小组）的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科

2、大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应法律责任。研究生签名导师签章二级学院领章：^^力^年3激4曰)河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名导师签章：獨隱泛力/r年3k^B目录中文摘要......................................................1英文摘要..

3、....................................................4英文缩写......................................................7研究论文TGF-β1诱导食管鳞状细胞癌细胞TE13发生上皮间质转化及其参与放射抗性的分子机制前言......................................................8材料与方法................................................9结果.

4、....................................................20附图.....................................................23附表.....................................................28讨论.....................................................30结论.............................................

5、........32参考文献.................................................33综述EMT参与放射抗性形成的分子机制........................36致谢.........................................................42个人简历.....................................................43中文摘要TGF-β1诱导食管鳞状细胞癌细胞TE13发生上皮间质转化及其与参与放射抗性的

6、分子机制摘要目的：以体外培养的食管鳞状细胞癌细胞株TE13为实验对象，通过放射线反复照射筛选出的具有EMT样表型的放射抗性细胞株TE13R120，并利用转化生长因子-β1（TransformingGrowthFactor-β1,TGF-β1）诱导TE13细胞发生上皮间质转化（Epithelial-mesenchymaltransition,EMT），建立EMT细胞模型。对TE13细胞株、EMT模型细胞和TE13R120细胞进行Real-TimePCR、Westernblot、免疫细胞化学检测，测定这三株细胞株中神经营养因子受体（neuro

7、trophinreceptorp75interactingMAGEhomologue，NRAGE）基因的表达和细胞内定位情况。探讨食管癌细胞中NRAGE亚细胞定位在EMT与放射抗性形成中的作用，对深入研究食管癌细胞的恶性生物学行为具有重要意义，为放射抗性造成的放疗失败提供一种新的思路和实验依据，同时也为肿瘤治疗提供了新的靶点。方法：人食管鳞状细胞癌细胞株TE13常规培养，待细胞进入对数生长期后用于实验。实验分为三组：TE13细胞组、EMT细胞模型组、TE13R120细胞组，通过Real-TimePCR、Westernblot和免疫细胞化学

8、三种实验技术分别检测NRAGE的mRNA表达情况及总蛋白、胞浆蛋白、胞核蛋白的表达情况。其中TE13R120细胞株经过放射线反复照射筛选TE13累积剂量120Gy所得，通过细胞克隆形成实验验证