mirna 200c对a549mtx耐药细胞迁移和侵袭作用的研究

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1、．‘．。．护’－托，．．，．．於．（，心．－：．（：Ｒ４４６１单：１０４２２分类号．位代码密级：公开学号：２０１３２３００３３儀人／乂《編ＳＨＡＮＤＯＮＧＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ硕±学位论文ＴｈｅｓｉｓｆｏｒＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅｇ（专业学位）论文题目：ｍ旧ＮＡ２００ｃ对Ａ５４９／ＭＴＸ耐药细胞迁移和侵袭作用的研究．．．．Ｖ：作者姓名孙永梅培养单位安徽省立医院专业名称临床检验诊断学指导教肺王保龙教授合作导师２０１５年１０月

2、９日，、ＷＩ单位代码分类号：Ｐ；１０４２２３０密级；：么学号２０１＾＾守５、鶏如ｔ、１ｉ）硕±学位论文（专业学位）论文题目：ｍｉＷ：１（；〇Ｃ对抑《啦ｉ膽处城狀该參件钥餐衣可已—减ｏｎＷＷ瓜爭Ｃｔ〇的｛ｆｊｃＷＩ）Ｖ心ｗｑ心Ｊ种非瞒／作者姓名、＜＾１如水接学院名称畏ｔ接史、Ｐ专业学位名称东Ｕ化硫寸化作可指导教师Ｌ危‘啤合作导师王０１５１０．年弓ｙ日原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导

3、下，独立进行研究所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的。研究作出重要贡献的个人和集体，均己在文中Ｗ明确方式标明本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名：日期：女〇、１乃关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采

4、用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。（保密论文在解密后应遵守此规定）＜ｒ．论文作者签名：讀导师签名：期：心４＾１＾日目录摘要ＩＡＢＳＴＲＡＣＴＩｌｌ第１章前言１－ｌｌｍＲＮＡｃ在肿瘤中的应用１．ｉ２００１丄１ｍＲＮＡ概述１ｉ１１ｍＲＮＡｓ１．．２ｉ家族简介－１．１３ｍｉＲＮＡ２００ｃ３．与肿瘤诊断１－．１．４ｉＲＮＡ２００ｃ与肿瘤耐药ｍ４－１．１．５ｍｉＲＮＡ２００ｃ与肿瘤转移６１－．１．６ｍｉＲＮＡ２００

5、７ｃ的应用展望１．２肺癌及ＭＴＸ耐药８１２．１８．肺癌１．２．２甲氨噪吟耐药８－１．３２００ｃＭＴＸ耐９ｍｉＲＮＡ与药的关系１．４１０本研究的目的及意义１．４．１目的１０１．４．２１０意义第２章材料与方法１１２．１材料与仪器１１２丄１材料１１２丄２主要仪器１１２丄３常用洛液的配制１２２．２实验方法１４２．２．９／：１Ａ５４ＭＴＸ细胞培养１４２．２．２细胞传代１４２．２．３细胞冻存１４２．２．４细胞复

6、苏１４２．２．５耐药细胞诱导１５２２５．．６四甲基偶氮挫蓝（ＭＴＴ检测耐药指数（ＲＩ）１）２．２．７细胞转染１６２．２．８Ａ细胞ＫＮ的提取１７一２．２．９ｃＤＮＡ第链的合成１８－２．２．１０实时焚光定量ＲＴＰＣＲ１８２１．２．１１细胞划痕实验９２．２．口细胞ｔｒａｎｓｗｅｌｌ迁移实验２０２．２．１３细胞ｔｒａｎｓｗｅｌｌ侵袭实验２１２．３统计学方法２１第３章实验结果２２３．１ＭＴＴ法检测耐药细胞指数（ＲＩ）２２Ａ５４９细ｍＡ－

7、ｃ３．２胞在ＭＴＸ诱导和ｉＲＮ２００转染后的改变２２３．２．１Ａ５４９细胞形态在ＭＴＸ诱导后的改变２２３ＲＮＡ－．２．２Ａ５４９／ＭＴＸ细胞形态在ｍｉ２００ｃ转染后的改变２２３Ａ－．３ｍｉＲＮ２００ｃ在各组细胞中的表达情况２３３．４各组细胞迁移和侵袭能力情况２４３．４．１细胞划痕实验结果２４３．４．２细胞ｔｒａｎｓｗｅｌｌ迁移实验结果２５３．４．３细胞Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ侵袭实验结果２５３－－．５转染ｍｉＲＮＡ２００ｃ后Ａ５４９／ＭＴＸ细胞ＥＺＨ２及Ｅｃａｄ表

8、达量变化结果２６第４章讨论２８第５章结论３１５－ＭＴＸ细胞．１２００ｃ能逆转Ａ５４９转染ｍｉＲＮＡ／形态改变３１－５Ａ２００ｃＡＮＡ－２００ｃ１．２转染ｍｉＲＮ后５４９／ＭＴＸ细胞表达ｉｎｉＲ增加３５－ＭＴＸ．３转染ｍｉＲＮＡ２００ｃ５４９／后Ａ细胞的迁移和侵袭能力降低３１５４Ａ－Ａ５４－２．转染ｍｉＲＮ２００ｃ后