micrornas在乳腺癌侵袭转移过程中的功能与机制研究

《micrornas在乳腺癌侵袭转移过程中的功能与机制研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、＾京碱如皆《促中風资５刮等據博±研究生学位论文北京协和医学院研究生院銷代码，１００２３学号；Ｂ２０１１００３００２博击学位论文ＭｉｃｒｏＲＮＡｓ在乳腺癌侵袭转移过程中的功能与机制研巧ＦｕｎｃｔｉｏｎａｌａｎｄＭｅｃｈａｎｉｓｔｉｃＳｔｕｄｉｅｓｏｎＭｉｃｒｏＲＮＡｓｉｎＨｕｍａｎＢｒｅａｓｔＣａｎｃｅｒＭｅｔａｓｔ；ａｓｉｓ研巧生：詹尝导师：刘芝华教授导师小组：詹启敏教授林晨教授料专业：细胞生物学研巧方向：肿瘤分子生物学入学时间！２００９年９月所在院所：中国医学科学院肿

2、巧區院二零一五年四月北京协和医学院中国医学科学院巧±研巧生学位论丈目录一－５４ｅｎｓｎｌ第部分ｍｉＲ巧作用于Ｔｉ并通过巧活Ｃｄｃ４２促进孰腺痛的侵袭转移中；摘要１英ｔ摘要３５前胃材料与方法９结果３６ｎ５３结论５８－ｍ－第二部分ＳＮＡＩｌｉＲ１８２负反馈环路调节ＥＭＴ，从而促进乱朦巧细胞的克隆形成和适端转移中文摘要巧英文摘要６１前ｍ６３材料与方法６９Ｓ＾８０＾９４结ｉｆｅ９９参考文献１００文献综化１１４基金资助１２７ＷＬ

3、１２８个人简历１３０学位论文原创性声明和授权使用说明１３２１北京协和医学院中国医学科学院博±研巧生学位论文表索引表＾１乳腺癌组织标本的临床病理资料９－表１２细胞培养基１０表Ｌ３ｍｉＲＮＡ，ｓｉＲＮＡ寡核昔酸链序列１２－表１４实验中使用的克隆、检测及突变ＰＣＲ引物１２表＾５实验中使用的试剂盒１４－表１６实验中使用的抗体１４表＾７实验中主要使用的细胞和生化分子试剂１５－主要使用的仪器设备表１８实验中１８表＾９去除ＤＮＡ污染配制组分２５－表１１０逆转录反应体系配制２６－Ｈ

4、定量ＰＣＲ反应体系配制表１２６－表１１２实时巧光定量ＰＣＲ循环参数２６表＾１３实时巧光定量ＰＣＲ循环参数（ＴｏｕｃｈｄｏｗｎＰＣＲ）２７－４表１１ＨｏｔＳｔａｒＴａｑＰｏｌｙｍｅｒａｓｅ反应体系２８表＾１５Ｈｏ仪陆ＴａｑＤＮＡＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＰＣＲ循环参数２８－２９表１１６ＰＣＲ片段双酶切反应体系表＾１７连接反应体系２９－表１１８突变ＰＣＲ反应体系３１－表１１９突变ＰＣＲ循环参数３１表－１２０退火反应体系３２表－１２１不同稀释度的ＢＳＡ标准液３３－ｍ表２１

5、ｉＲＮＡ，ｓｉＲＮＡ寡核巧酸链及ＩＳＨ探针序列７０－２表２实验中使用的克隆、检测及突变ＰＣＲ引物７０表２－３实验中使用的试剂盒７２－表２４实验中使用的抗体７２－表２５实验中使用的试剂７２ＩＩ北京协巧医学院中国医学科学院博±研巧生学位论文图索引－图Ｌ１ｍｉＲ５４８家族序列的核巧酸替代模式７图＾２实验中使用的质粒图谱１１３Ｓ－２５图＾茎环引物（ｔｅｍｌｏｏｐ）原理示意图１－４采用反向ＰＣＲ法突变特定ＤＮＡ序列的原理图图３１－］５ＭＲＮＡＬｉｂ３６图■ｉｃｒｏｒａｒｙ慢病毒文库筛选流程图Ｌ

6、６通过ｍｉｃｒｏＲＮＡＬ化ｒａｒｙ慢病毒文库筛选得到的可能促进弗腺癌侵袭转移的ｍｉｃｒｏＲＮＡ３７－－－图１７ｍｉＲ５４巧在体外促进ＭＣＦ７侵袭３８８－３９图ＬｍｉＲ５４巧在体外促进多种乳腺癌细胞系侵袭－－１９ｍＲ５４４０图抑制内源性ｉ巧能在体外抑制乱腺癌细胞侵袭－５４转移图ＬｌＯｍｉＲ巧促进現腺癌细胞在小鼠体内４１Ｔ－图Ｌ１１ｅｎｓｉｎｌ为ｍｉＲ５４巧的直接祀基因４３图＾＾Ｔｅｎｓｉｎｌ在体外抑制現腺癌细胞系的侵袭４４－－图１１３ｍｉＲ５４巧通过作用于Ｔｅｎｓｉｎｌ影响郭腺癌细胞的侵袭能力４

7、５－图＾１４ｍｉＲ５４巧通过Ｔｅｎｓｉｎｌ影响乳腺癌细胞在体内的转移能力４６－图＾１５ｍｉ民５４巧和Ｔｅｎｓｉｎｌ影响Ｃｄｃ４２的激活４７－－５４图１１６ｍｉＲ巧通过影响Ｃｄｃ４２进而影响乳腺癌细胞在体外侵袭４９图＾１７Ｔｅｎｓｉｎｌ通过影响Ｃｄｃ４２进而影响乳腺癌细胞在体外侵袭５０－５４８图＾１８ｍｉＲ、Ｔｅｎｓｉｎｌ和Ｃｄｃ４２在临床乳腺癌组织标本中与转移之间的关ｊ５２系姗一－６３图２１肿瘤转移是个多阶段、多步骤的过程－图２２肿瘤细胞的运动模式６４２－６９图３实验中使用的质粒图谱－２４

8、８０