fucoidan下调hif-1α表达抑制淋巴管新生与hca-f细胞侵袭转移能力的影响及机制研究

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2、嫂名：．／滕洪明穿；－．ＶＣ懇鑛操＾｜，＇、＇＾、，‘．、女；訂－．，＇、；＇’‘、＇、；．．．ｖ；女．．ｖ．的掉读护指导教师＇：磯喔＿＿＿＿＾￡＾１；＿＿＿；謂黃．．‘－？＇－■、■‘、：叫；生物化学与分子生物学如＇学科专业：马＇、’．＾．‘－＇＇占；却大连医科大学、乃追．纏龜，．Ｊ麵中图分类号密级Fucoidan下调HIF-1α表达抑制淋巴管新生与Hca-F细胞侵袭转移能力的影响及机制研究FucoidanSuppressesHypoxia-inducedLymphangiogenesisandMetastas

3、izeinMouseHepatocarcinomaHca-FCells滕洪明计：学位论文：61页表格：8个插图：12幅指导教师：邹向阳教授申请学位级别：硕士学位学科：生物化学与分子生物学培养单位：大连医科大学研究生院完成时间：二○一五年三月答辩委员会主席：独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意

4、。学位论文作者签名：签字日期：年月日关于学位论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于（请在以下相应方框内打√）：1.保密□，在年解密后适用本授权书。2.不保密□。作者签名：日期：年月日导师签名：日期：年月日目录一、摘要.1（一）中文摘要1（二）英文摘要3二、正文6第一部分低氧对小鼠肝癌Hca-F细胞活力、HIF-

5、1α表达的影响及fucoidan干预的作用研究（一）前言6（二）材料和方法..71.材料....................................................................71.1细胞系及实验动物................................................................71.2主要实验仪器及器材.........................................................................71.3主要实验试剂与药品.

6、.....................................................................71.4主要实验试剂的配置.........................................................................82.方法..............................................................................92.1细胞培养和药物处理......92.2低氧模型的建立.....92.3CCK-8法检测细胞活

7、力....102.4Trypanblue检测细胞毒作用...102.5AnnexinⅤ-FITC/PI检测细胞凋亡..102.6细胞核蛋白提取及定量102.7WB检测蛋白表达.....112.8免疫荧光检测蛋白表达...112.9酶联免疫吸附(Elisa)检测细胞分泌蛋白的表达...112.10核酸mRNA提取及定量122.11TransScriptReverseTranscriptase核酸反转录.....132.12TransStartTopGreen染料法qRT-PCR步骤...142.13TakarkaExTaq法PCR步骤...