dj-1对卵巢癌skov3细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

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1、分类号：密级：UDC：学号：406521312494南昌大学硕士研究生学位论文DJ-1对卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡和侵袭的影响EffectofDJ-1ontheproliferation,apoptosisandinvasionofovariancarcinomaSKOV3cells邓卫平培养单位(院、系)：江西省妇幼保健院指导教师姓名、职称：舒宽勇教授申请学位的学科门类：医学学科专业名称：妇产科学论文答辩日期：2015年6月答辩委员会主席：谭布珍评阅人：郑月慧林红2015年6月一、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导

2、下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名（手写）：签字日期：年月日二、学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索

3、，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权北京万方数据股份有限公司和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务，同意按“章程”规定享受相关权益。学位论文作者签名（手写）：导师签名（手写）：签字日期：年月日签字日期：年月日论文题目姓名学号论文级别博士□硕士□院/系/所专业E_mail备注：□公开□保密（向校学位办申请获批准为“保密”，年月后公开）I摘要摘要目的：本研究利用RNA干扰技术(RNAinterfer

4、ence，RNAi)抑制卵巢癌SKOV3细胞DJ-1的表达，探讨DJ-1对卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡和侵袭等生物学特性的影响。方法：1.设计并合成3对针对DJ-1的小干扰RNA(smallinterferingRNA，siRNA)，采用阳离子脂质体法瞬间转染SKOV3细胞。实验分组：①正常对照组；②阴性对照组；③siRNA-DJ-1-a组；④siRNA-DJ-1-b组；⑤siRNA-DJ-1-c组。2.通过蛋白印迹法（WesternBlot）检测各组细胞中DJ-1蛋白的表达，筛选出干扰效果最佳的序列。3.分别采用MTT比色法、流式细胞术和T

5、ranswell侵袭实验检测DJ-1对SKOV3细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。结果：1.Westernblot检测siRNA对DJ-1蛋白表达的影响，结果显示：转染后48h，正常对照组与阴性对照组相比，DJ-1蛋白表达差异无统计学意义（0.51±0.02vs0.50±0.02，P>0.05）。而siRNA-DJ-1-a组、siRNA-DJ-1-b组、siRNA-DJ-1-c组均显著低于其它对照组，差异有统计学意义（0.07±0.01、0.11±0.02、0.10±0.01vs0.51±0.02、0.50±0.02，P<0.05），其中siRNA-

6、DJ-1-a组较其它两组抑制效果更明显，差异有统计学意义（0.07±0.01vs0.11±0.02，0.07±0.01vs0.10±0.01，P<0.05）。2.MTT比色法检测siRNA-DJ-1-a对SKOV3细胞增殖的影响，结果显示：siRNA-DJ-1转染后12h，正常对照组、阴性对照组、siRNA-DJ-1-a组细胞增殖率差异无统计学意义(P>0.05)，而siRNA-DJ-1转染后24h、48h和72h，siRNA-DJ-1-a组细胞增殖率明显低于正常对照组(24h，0.379±0.044vs0.492±0.035；48h，0.48

7、6±0.059vs1.127±0.078；72h，0.738±0.046vs1.373±0.055)和阴性对照组(24h，0.379±0.044vs0.460±0.057；48h，0.486±0.059vs1.043±0.080；72h，0.738±0.046vs1.350±0.067)，差异有统计学意义(P<0.05)。II摘要3.流式细胞术检测siRNA-DJ-1-a对SKOV3细胞凋亡的影响，结果显示：siRNA-DJ-1转染后24h，正常对照组与阴性对照组的早期凋亡率相比，差异无统计学意义(1.77±0.71%vs2.83±0.55%，

8、P>0.05)，而siRNA-DJ-1-a组的早期凋亡率明显高于正常对照组（27.97±9.86%vs1.77±0.71%）和阴性对照组（27.97±