derlin-1在rle-6tn细胞内质网应激诱导性凋亡中的作用研究

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1、分类号Ｒ４密级公开ＵＤＣ６１０编号１０５５５＠為＃义掌ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＳＯＵ了ＨＣＨＩＮＡ硕±学位论文（专业学位）Ｄｅ－－ｒｌｉｎ１在ＲＬＥ６ＴＮ细胞内质网度激诱导性调古中的作巧研究－研究生姓名；孙银辉指导教师姓名、职称：胡瑞成教授学科专业：临床医学研究方向：呼吸病学（慢性阻塞性肺疾病）所在学院：湖南省老年医院二０—五年五月Ｄｅｒ－１ＲＬＥ－１ｉｎ在６ＴＮ细胞内质网度激诱导性调亡中的作巧研究论文作者签名：巧＞靴．气指导教师签名？？４叫论

2、文评阅人１；苏晓丽，韦巧民师，硕导，中南大学湘雅民院一评阀人２；汤渝玲，主任医师，硕导，长沙市第民院评阅人３：答辩委员会主席：黄信刚，教授，硕导，中南大学湘雅二医院委员１：李柏完，教授，南华大学附属第Ｈ医院委员２；胡瑞成，主任医师，硕导，湖南省老年展院委员３；朱黎明，丰任医师，硕导，湖南省老年医院委员４；蒋永亮，副主任医师，硕导，湖南省老年医院委员５；委员６：答辩日期：２０１５年０５月２２日南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取

3、得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或巧书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均己在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名过０年５月立之日南华大学学位论文版权使用授权书本学位论文是本人在南华大学攻读（博／硕）±学位期间在导师指导下完成的学位论文，。本论文的研究成果归南华大学所有本论文的研究内容不得Ｗ其它单位的名义发表。本人同意南华大学有关保留、使用

4、学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可Ｗ公布学位论文的全部或部分内容，可Ｗ采用复印、缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国家或湖南省有关部口规定送交学位论文。同意学校将论文加入《中国优秀博硕±学位论文全文数据库》，并按《中国优秀博硕±学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益。同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学位论文，解密后适用该授权。＇作者签名？哀三么０：乐！巧年方月导师签名：

5、年＾月义勘Ｗ－－ＤｅＨｉｎ１在化Ｅ６ＴＮ细胞内质网应激诱导性網ｔ中的作用研究腑要］－目的：探索抑制Ｄｅｒｌｉｎ１表达是否增加香烟烟雾（巧Ｅ）诱导的－６ＴＮ化Ｅ细胞调ｔ，Ｗ及其作用机理是巧与内质网应激（Ｅ盼）机制Ｄ－－ｅｒｌｉｎ１化Ｅ６ＴＮ相关，从而初步探讨在香烟烟雾诱导的细胞内质网应激诱导性调亡中作用。－ｌｉ－ｉＲＮＡ方法：ＲＬＥ６ＴＮ细胞培养Ｄｅｒｎ１干扰序列的ｓ；用携带侵染ＲＬＥ－－６ＴＮ细胞Ｄｅｒｉｉｎ１，用加入等量空白质粒组作为对照沉默基因；ＬＥ－６ＴＮ细Ｏｈ３ｈ６ｈ制备ＣＳＥ；用１０％Ｃ

6、沈处理对照组、沉默组Ｒ胞、、、１２ｈ、２４ｈ后：流式细胞仪检测干预前后细胞调ｔ：率；免疫巧光技术、ｔ－ｅｒｌ－－Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ、ＲｅａｌｉｍｅＰＣＲ技术检测干预前后Ｄｉｎ１、ＰＩ旭１、化ｄ－ｌ、ＰＪＭ、ＣＨＯＰ蛋白及ｍＲＭ的表达；－结果：１．流式细胞技术检测细胞调亡：ＲＬＥ６ＴＮ细胞在１０％ＣＳＥ处理她、３ｈ、６ｈ、１２ｈ、２地后，大鼠肺ＩＩ型上皮细胞在对照组早期调ｔ率分别为：５．８％、７．１％、１２．２％、１４．５％、２２．１％，沉默组早期调亡率分别、．．为为１５．４％、巧．７％、３３％

7、４３３％、４８９％，对照组与沉默姐细胞随时间延长细胞调亡率呈上升趋势，沉默组细胞调亡在早期和晚期都明显高于对照组．０５）。，差异具有显著性（Ｐ＜〇２－生长．Ｄｅｒｌｉｎ１免疫焚光技术检测蛋白质巧光表达显示：自然－ｌｉ－０＋６ＴＮ细胞经ＣＳＥ处理后．１１７的ＲＬＥ，Ｄｅｒｎ１蛋白质表达水平（Ｉ南华大学硕去学位论文０．０１１）高于对照细（０．０９５＋０．００５），差异具有湿著性（Ｐ〈０．０５）；－１－ｌｉ－Ｄｅｒｌｉｎ沉默组化Ｅ６ＴＮ细胞经ＣＳＥ处理后，Ｄｅｒｎ１蛋白表达水平（０．０６４＋０．

8、００３）高于对照组（０．０１４＋０．００１），差异具有显著性－０ｅｒｌ－（Ｐ〈．０日）。Ｄｉｎ１干扰前后Ｃ沈处理组Ｄｅｒｌｉｎ１蛋白表达水平均增加。３－－．Ｗ