aurora-a对卵巢癌血管生成的影响

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1、分类号：R733.31学校代码：10062密级：学号：2012602221硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目：Aurora-A对卵巢癌血管生成的影响TITLEInfluenceofAurora-Aonangiogenesisinovariancancer一级学科：临床医学二级学科：肿瘤学论文作者：王营指导教师：倪虹天津医科大学研究生院二〇一五年五月分类号：R733.31学校代码：10062密级：学号：2012602221学位类别：科学学位专业学位学科门类：医学硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目：Aur

2、ora-A对卵巢癌血管生成的影响TITLEInfluenceofAurora-Aonangiogenesisinovariancancer一级学科：临床医学二级学科：肿瘤学论文作者：王营指导教师：倪虹天津医科大学研究生院二〇一五年五月学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授

3、权书本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。保密，在年解密后适用本授权书。本论文属于不保密。（请在相对应的方框内打“√”）学位论文作者签名：日期：年月日导师签名：日期：年月日中文摘要目的：Aurora-A是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族的成员之一，它是一种中心体相关蛋白，参与调节中心体的功能、纺锤体的组装及染色体的分离。Aurora-A在很多肿瘤组织中过度表达，并

4、且与肿瘤的发生、发展及预后密切相关。血管生成是肿瘤生长及转移的关键环节，抗血管生成治疗成为肿瘤研究的热点之一。本研究旨在阐述浆液性卵巢癌组织中Aurora-A和VEGF表达的相关性及其临床意义，并进一步探讨Aurora-A对卵巢癌血管生成能力的影响。方法：采用免疫组织化学SP法检测Aurora-A及VEGF在57例浆液性卵巢癌组织标本中的表达，分析两者的相关性及其与临床病理特征和预后的关系。构建过表达Aurora-A质粒及空白载体对照质粒，并将其转染至卵巢癌SKOV3细胞中。WesternBlot检测SKOV3细胞中目的蛋白Aurora-A的表达水平。采用

5、ELISA检测Aurora-A对SKOV3细胞VEGF蛋白分泌水平的影响。收集过表达Aurora-A组SKOV3细胞及对照组SKOV3细胞的上清，制备条件培养基。用不同的条件培养基培养HUVECs，并分别采用MTT实验、细胞划痕修复实验、Transwell侵袭实验及小管形成实验检测Aurora-A对HUVECs增殖、迁移、侵袭及成管能力的影响。结果：1.Aurora-A及VEGF在浆液性卵巢癌组织中的阳性表达率分别为56.1%(32/57)及63.2%(36/57)，二者表达呈显著正相关(r=0.604,P<0.001)；共同表达Aurora-A及VEGF

6、与卵巢癌的FIGO分期、恶性腹水、残留病灶大小、有无淋巴结转移及复发状态显著相关(P<0.05)；Kaplan-Meier生存分析显示，共同表达Aurora-A及VEGF的患者中位无进展生存时间(PFS)及总生存时间(OS)更短(P<0.05)，Cox回归分析表明共同表达Aurora-A及VEGF是影响卵巢癌患者PFS(P=0.035)及OS(P=0.030)的独立预后因素。2.获得高表达Aurora-A的卵巢癌SKOV3细胞株，WesternBlot检测到目的基因Aurora-A在转染Aurora-A-GFP融合蛋白质粒的细胞中为过表达。3.ELISA实

7、验结果显示，与对照组相比，Aurora-A可以促进卵巢癌SKOV3细胞VEGF蛋白的分泌。I4.MTT实验结果显示，与对照组相比，过表达Aurora-A细胞的条件培养基可以提高HUVECs的增殖活性。5.细胞划痕修复实验结果显示，与对照组相比，过表达Aurora-A细胞的条件培养基可以增强HUVECs的迁移能力。6.Transwell实验结果显示，与对照组相比，过表达Aurora-A细胞的条件培养基可以增强HUVECs的侵袭能力。7.成管实验显示，与对照组相比，过表达Aurora-A细胞的条件培养基可以促进HUVECs的成管能力。结论：1.Aurora-A

8、与VEGF在卵巢癌组织中的表达具有显著相关性，共同表达Aurora