633nm低能量红光刺激活性氧增加对人角质形成细胞增殖的影响研究

《633nm低能量红光刺激活性氧增加对人角质形成细胞增殖的影响研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号：100210学校代码：10661学号：2012361密级：公开硕士学位论文（专业学位）633nm低能量红光刺激活性氧增加对人角质形成细胞增殖的影响研究姓名：陈志勇专业：整形外科研究方向：创面修复导师：李栋梁教授培养单位：遵义医学院2015年5月目录1、论文：633nm低能量红光刺激活性氧增加对人角质形成细胞增殖的影响研究…………………………………………1中英文缩略词表………………………………………………1中文摘要………………………………………………………2英文摘要………………………………………………………3前言…………………………………

2、…………………………5材料与方法……………………………………………………7结果……………………………………………………………11讨论……………………………………………………………16结论……………………………………………………………18参考文献………………………………………………………192、综述……………………………………………………………22参考文献………………………………………………………313、致谢……………………………………………………………354、作者简介………………………………………………………36中英文缩略词表缩略词英文全称中文

3、全称HaCaTHumanimmortalskinkeratinocyteline人永生化皮肤角质形成细胞KSCkeratinocytestemcells表皮干细胞TACTransitamplifyingcells短暂扩增细胞CCK-8CellCountingKit-8细胞增殖、毒性检测试剂盒DCFH-DAReactiveOxygenSpeciesAssayKit活性氧检测试剂盒ROSReactiveOxygenSpecies活性氧PBSPhosphatebalancedsolution磷酸盐缓冲液FCSFetalcalfserum胎牛血清RPM

4、I-1640RoswellparkmemorialinstituteRPMI-1640培养基1640DMSODimethylsulfoxide二甲基亚砜HEPESHydroxyethylpiperazine羟乙基哌嗪乙黄酸ethanesulfonicacid2J/cmJoulepersquarecentimeter焦/平方厘米RpmRotationperminute转/分钟nmManometer纳米hHour小时minMinute分钟SecSecond秒MMole摩尔mmolmillimole毫摩尔µmolMicromole微摩尔LLitre升

5、mlMilliliter毫升µlMicroliter微升1中文摘要目的：观察红光照射人角质形成细胞株（HaCaT）后，细胞内活性氧（ROS）浓度的变化对细胞增殖活性的影响。方法：22建立人角质形成细胞体外培养模型，分别用0.082J/cm（10S）、0.164J/cm2222（20S）、0.245J/cm（30S）、0.491J/cm（60S）、1.472J/cm（180S）、2.453J/cm22（300S）、4.91J/cm（600S）、9.81J/cm（1200S）8个不同能量密度波长为633nm的红光照射人角质形成细胞株（HaCaT），

6、对照组不照光，DCFH-DA（活性氧检测试剂盒）孵育1小时后用酶标仪分别于孵育后0h、0.5h、1h、2h测定荧光值，反映细胞内ROS的浓度变化；用相同的照射条件照射人角质形成细胞株，每8小时照射1次，照射6次48小时后CCK-8（细胞增殖试剂）孵育4h，酶标仪进行荧光值测定，反映细胞增殖情况，根据细胞内由DCFH-DA探针孵育后检测的荧光结果，设计对照组、22220.082J/cm（10S）组、0.491J/cm（60S）组、2.453J/cm（300S）组、9.81J/cm（1200S）组、阳性探针检测组6个组用红色线粒体示踪剂Mito-T

7、racker染色线粒体，同时每个组细胞内孵育活性氧探针，在共聚焦显微镜下观察ROS的来源和线粒体的关系。结果：DCFH-DA孵育1小时后0h，0.5h，1h，2h四个时相点测定荧光值，能量密22度在4.91J/cm及以下实验组，荧光值均有不同程度的增高，其中2.453J/cm能量密度组，1h时相点荧光值升高最明显，和对照组相比，具有明显的统计学意义，能2量密度在4.91J/cm以上的实验组，荧光值升高呈下降趋势，和对照组相比，没有明2显的统计学意义。CCK-8孵育4小时后测定荧光值，4.91J/cm以下实验组荧光值增2加明显，其中2.453J/

8、cm能量密度组最明显，和对照组相比具有明显的统计学意义，2能量密度在4.91J/cm以上的实验组，荧光值降低，和对照组相比，没有明显的统计学意义。共聚