鱼腥草素钠抗lps诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞炎症的分子机制

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1、分类号：单位代码：密级：学号：博士学位论文鱼腥草素钠抗诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞炎症的分子机制研究生：朱琪指导教师：许剑琴教授合作指导教师：刘凤华教授申请学位门类级别：农学博士专业名称：临床兽医学研究方向：中兽药研发所在学院：动物医学院年月独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中已经注明引用和致谢的内容外，论文中不包含本人和其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢

2、意。关于学位论文使用授权的说明本人完全了解中国农业大学有关保留、使用学位论文的规定。本人同意中国农业大学有权保存及向国家有关部门和机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人同意中国农业大学将本学位论文的全部或部分内容授权汇编录入《中国博士学位论文全文数据库》或《中国优秀硕士学位论文全文数据库》进行出版，并孕受相关叙益。保密的学位论文在解密后应遵守此协议）ChinaAgriculturalUniversityPhDDissertationSodiumhouttuyfonateinhibitsinflammationbyblockingtheMAPKs

3、/NF-kBsignalingpathwaysincowendometrialepithelialcellsPhDcandidate:QiZhuSupervisor:JianqinXuCo-Supervisor:FenghuaLiuMajor:ClinicalVeterinaryMedicineResearchfield:ResearchandDevelopmentofTraditionalChineseVeterinaryMedicineBeijingChinaMay2015本研究由下列课题和项目提供资助：国家“十二五”科技支撑计划重点项目（农业部公益性行业（

4、农业）科研专项项目（北京市教委创新团队的建设与教师职业发展项目—摘要奶牛产后子宫内膜炎是由致病微生物上行感染母牛生殖道而引起的炎症。大肠杆菌是主要的致病菌之一，但其发病机制并不十分清楚。鱼腥草素钠（，是鱼腥草有效成分鱼腥草素的亚硫酸氢钠加成化合物，稳定性强，临床上用于治疗炎症疾病。目前鱼腥草素钠对抗炎症疾病的分子机制还不完全清楚，我们假设充当关键调解物，从体外细胞水平探明其抗炎分子机制。并在体内对小鼠子宫内膜炎模型和奶牛子宫内膜炎的疗效进行观察。从而深入研究抗炎活性和其药理机制。本研究运用体外原代培养细胞的方法，分离鉴定了奶牛子宫内膜上皮细胞和基质细胞。并对培养

5、获得的原代细胞进行了不同染色方法的形态学观察和透射电镜观察。在此基础上，建立诱导的奶牛子宫内膜上皮细胞炎症模型。为了评估的体内外抗炎作用，首先用法和分析检测梯度浓度的对的毒性；其次用和方法分别从蛋白分泌和表达两个水平检测细胞炎性因子、、和，同时用的方法检测细胞内炎症信号转导通路的关键蛋白、、、和；最后用临床诊断的方法评估治疗小鼠和奶牛子宫内膜炎的疗效。研究表明，运用组织培养和复合酶消化结合差时技术可以分离出纯度很高的为后续的实验提供了足够的细胞。不同染色方法对子宫内膜细胞观察可知其细胞结构清晰，胞浆胞膜分明；超微结构观察结果显示，体外培养的子宫内膜上皮细胞可清晰

6、看到微胞凸，胞内各种细胞器清晰可见。细胞毒性实验显示，浓度范围内对无毒副作用；，高中低浓度的可以抑制诱导的、、和的蛋白分泌水平，并呈浓度依赖关系；对炎性细胞因子的有同样的调控作用。而且，在激活的中，抑制了的降解和的磷酸化；压制了、、磷酸化水平。体内疗效实验证实，能够显著减弱模型组小鼠子宫内膜的炎性反应，子宫指数与正常对照组差异不显著，镜检子宫组织显示显微结构基本正常，表明对实验性子宫内膜炎模型小鼠有很好的治疗效果。用治疗奶牛临床型子宫内膜炎受孕率达到发情头数占总头数的。而用土霉素治疗奶牛受孕率为发情头数占总头数的。在发情头数和受孕率上的治疗效果优于土霉素。关键词

7、：奶牛子宫内膜炎；脂多糖；鱼腥草素钠；AbstractEndometritisofcowsareinflammationwhichinfectedbypathogenicmicroorganism.E.coliisoneofthemajorpathogenicbacteria,butpathogenesisofendometritisisnotveryclear.Sodiumhouttuyfonate(SH)isasodiumbisulfiteadditioncompoundofactiveingredientscordatehouttuyniacordateh

8、outtuyniaele