高产角鲨烯类酵母pseudozyma sp.sd 301的筛选、鉴定及发酵条件的优化

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1、變）寸尚如作々ＯＣＥＡＮＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＣＨＩＮＡ硕±学位论文ＴＩＯＮＭＡＳＴＥ民ＤＩＳ化民ＴＡ＾戶ｓｅｕｏｏｚ／Ｔ／ａｓＳＤ３０１ｙｐ．的币选、高产角璧￣稀类薛母论文题目：鉴定及发薛条件的优化ｆｔｅｎｔａｔｉｏｎＯｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆｉｏｎａｎｄＦｅｉＴｎＳｃｒｅｅｎｉｎｇＩｄｅｎｔｉｉｃａｐ’ｔ加之＂！０ｓｐ．ＳＤ３０１陆ｈＳａｌｅｎｅＰｒｏ加ｃｉｏｎＹｅａｓｔＡｅｗ＞英文题目；ｇｑｕ：王晓龙作者：李文利指导教师全日制学术学位学位类别；生药学专业名称：

2、海洋药物生物合成硏究方向：？■，？■Ｔ一＊Ｉ谨レ乂此论文献给我敬爱的导师和所有支持、关心、帮助我的人们！—王晓龙高产角盞婦类酵母ｓｐ．ＳＤ３０１的筛选、鉴定及发酵条件的优化＇Ｉ－是学位论文答辩日期：叫若指导教师签字：’ｒ夕答辩委员会成员签字：Ｊ独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包含其。据我所知他人己经发表或撰写过的研究成果，忡，不向含未获得中国海津大学或其他教育机构的学位或证书使用过的材料一同工作的同志对本

3、研巧所做的任何贡献。与我均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名签字日期：年月日２＾学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留，并同意Ｗ下、使用学位论文的规定事项：１、学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。２，、学校可Ｗ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索可Ｗ＂采用影印、缩印或扫描等复制手段保存。同时授权清华大学中、汇编学位论文’’国学术期刊（光盘版）电子杂志社用于出版和编入ＣＮＫＩ《中国知识资源总库》，授权中国科学技术信息研巧所将本学位论文收录到《中国学位

4、论文全文数据库》。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名导师签字：签字曰期年月７＾签字曰期：年＾月曰取＾高产角塞帰类酵母戶ｓ．ＳＤ３０１的筛选ｐ、鉴定及发醇条件的优化摘要、角璧婦是重要的化学活性物质，因其具有抗肿瘤、缓衰老抗病毒等多种生理功能而被广泛应用于医药、食品、化妆品等领域。但是角酱痛昂贵的价格限制了其使用和普及。目前角签帰主要来源于深海馨鱼，然而深海酱鱼属于稀缺资源，并且对维护海洋生态环境平衡非常重要，与此同时角签稀较高的生产成本及签鱼。自身安全卫生问题，使寻找角響婦新来源显得十分迫切化学合成角签婦的技术复

5、杂且不稳定，植物角墅稀来源广泛但是含量极低，从而使利用海洋微生物生产角签婦成为引人瞩目的发展趋势，海洋微生物菌株发酵获取角藝稀具有质量优质。因此，本研究、生产周期短、不受时间地域限制、易操作、安全卫生等优点一一分离获得株高产角望痛菌株，对其生理生化性质进行研究，并进步进行发酵优化，最终得到利用该菌株进行微生物发酵生产角整巧的整套工艺，为微生物生产角签蹄王业化提供基础：。具体研究结果如下１．对实验室从云南、广东、浙江、海南的红树林、海滩与河口的采集的腐叶、水样、泥样中筛选的菌株进行分离纯化，并对其产角蠻稀能力进行测定，其中，角－Ｊ一＞０＞０Ｉ營稀产量．

6、１５ｇ丄的菌株两株，．２５ｇ丄的株，并建立菌种库。２．采用微生物学手段分离筛选得到高产角Ｓ稀菌株ＳＰ．ＳＤ３０１，并运用分子生物学手段进行种属鉴定，结合对其形态学及理化性质进的研巧，碗定了ＡｅｗｏｂＴＯ口Ｓ．ＳＤ３０１的种属为类酵母。ｖ皆Ｐ－３ｌ，．通过单因素试验、ＰａｃｋｅｔＢｕｒｍａｎ实验设计，响应面法优化发酵培养条件得－ＤＩｉ６７．２２Ｌ、到响应面模型，通过ｅｓｇｎｅｘｐｅｒｔ软件分析得到在葡萄糖浓度为ｇ接％°１５３％Ｃ、装液量在４１ｍＬ／２５０ｍＬ的最优培养条件下，种量为．、培养温度为レｌ．角璧稀产量理论最大值可达１１５０８ｇ。为了检

7、验模型预测的准确性，在优化＾ｉ的条件下进行发酵实验验证．１５２０，，所得角馨帰产量为１ｇ与预测产量十分接近，由此判断该模型能准确预测实际发酵情况。使用５Ｌ发酵罐培养ｆｗＭｃ／ｏｑｗｆｌ＾ｉＳＰ．ＳＤ３０１，在批次培养中，角營稀产量为０．７８９９ｇ。关键词：角藝稀，Ｐｓｅｕｄｏｚｙｍａ，发薛优化，响应面ＳｃｒｅｅｎｉｎｇＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄＦｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎＯｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆＨｉｈｐｇＳｕａｌｅｎｅＰ