降钙素基因相关肽促进体外培养的神经干细胞向神经元分化

《降钙素基因相关肽促进体外培养的神经干细胞向神经元分化》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、SOOCHOWUNIVERSITY硕士学位论文论文题目降钙素基因相关肽促进体外培养的神经干细胞___________________向神经元分化_______________研究生姓名___________________张涛______________指导教师姓名___________________沈忆新______________专业名称__________________骨外科学_____________研究方向_________脊柱外科的基础与临床研究论文提交日期2015年3月苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明.•所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所

2、取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。论文作者签名苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所（含万方数据电子出版社)、中国学术期刊（光盘版）电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许

3、论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属在____年_月解密后适用本规定。非涉密论文口论文作者签名日期：导师签名:降钙素基因相关肽促进体外培养的神经干细胞向神经元分化中文摘要降钙素基因相关肽促进体外培养的神经干细胞向神经元分化中文摘要目的：探索降钙素基因相关肽(Calcitoningene-relatedpeptide，CGRP)对体外培养的新生小鼠室管膜下区神经干细胞增殖和分化的影响。方法：分离新生小鼠室管膜下区组织，经机械法和酶消化法制成单细胞悬液，抗SOX-2和抗Nesti

4、n免疫荧光染色，鉴定分离培养的细胞。以未添加bFGF和EGF的无血清培养基诱导神经干细胞分化。取体外培养至第3代的神经干细胞，分为4组，分别为对照组、1nMCGRP组、10nMCGRP组、100nMCGRP组。MTT法寻找体外培养神经干细胞最佳的增殖时间，BrdU标记法和神经球体积测量法来检测各组之间神经干细胞增殖能力的差异。采用免疫细胞化学染色方法来标记神经元（NeuronalclassIIIβ‐，tubulinTuj-1）、星形胶质细胞（Glialfibrillaryacidicprotein，GFAP），并分别统计体外诱导分化培养3天、7天各组之间Tuj-1阳性细胞占总细胞数的

5、比例,进而比较不同体外培养时间各组之间神经干细胞向神经元分化的能力的强弱。结果：MTT法提示体外培养4天神经干细胞增殖能力最强。体外培养4天时，各组之间的BrdU阳性细胞数及神经球体积无明显差异。体外诱导分化3天，对照组、1nMCGRP组、10nMCGRP组、100nMCGRP组中Tuj-1的百分比分别为(26.1±5.1)%,(28.1±6.1)%,(34.7±4.8)%及(56.0±5)%，其中100nMCGRP组中Tuj-1的百分比相对于其他3组明显升高（P<0.05）；而体外诱导分化7天，对照组、1nMCGRP组、10nMCGRP组、100nMCGRP组中Tuj-1的百分比依

6、次为(45.4±4.2)%,(53.8±4.3)%,(70±2.6)%和(48.8±4.1)%，其中10nMCGRP组中Tuj-1的百分比相对于其他3组明显升高（P<0.05）。结论：CGRP无明显促进体外培养的神经干细胞的增殖作用，但是可以促进体外培养的神经干细胞向神经元分化，而且这种促分化作用具有浓度及时间依赖性。关键词：降钙素基因相关肽；室管膜下区；神经干细胞；增殖；分化。作者：张涛指导教师：沈忆新教授IAbstractCalcitoningene-relatedpeptidestimulatesneuronaldifferentiationofneuralstemcellsi

7、nvitroCalcitoningene-relatedpeptidestimulatesneuronaldifferentiationofneuralstemcellsinvitroAbstractObjiective:Toinvestigatetheeffectsofcalcitoningene-relatedpeptide(CGRP)ontheproliferationandneuronaldifferentiationofneuralstemcel