铁补充对雄性大鼠淋巴细胞和生殖系统氧化损伤影响的研究

铁补充对雄性大鼠淋巴细胞和生殖系统氧化损伤影响的研究

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1、分类号:R151.2密级:UDC:610学校代码:11065硕士学位论文铁补充对雄性大鼠淋巴细胞和生殖系统氧化损伤影响的研究何丽敏指导教师马爱国教授学科专业名称营养与食品卫生学论文答辩日期2015年6月1日摘要目的铁摄入过量可诱导机体氧化应激,造成细胞氧化和组织器官损伤,本文旨在观察不同剂量铁对雄性大鼠淋巴细胞及生殖系统的影响。方法SPF级6~7周龄雄性Wistar大鼠40只,按体重随机分为4组,每组10只,即对照组、低剂量铁组、中剂量铁组、高剂量铁组,隔日腹腔注射右旋糖酐铁,含铁量分别为0.9mg、0.3mg、9mg、18mg,连续干预12周。

2、4组大鼠自由饮用去离子水,喂饲无铁饲料,于第12周末眼眶取血,测定血清铁浓度,采用“彗星”电泳法及损伤等级法(AU)分析和评价大鼠外周血淋巴细胞DNA损伤状况;处死大鼠,留取雄性生殖器官,计算精子数量、精子运动率、精子畸形率,并检测睾丸组织中铁含量及GSH-Px、SOD、CAT、MDA水平。结果经过12周补铁干预后,低剂量铁组大鼠血清铁含量为53.54μmol/L明显低于对照组的74.94μmol/L(P<0.001),而中剂量和高剂量铁组大鼠血清铁含量分别为104.77μmol/L和205.12μmol/L,显著高于对照组(P值均<0.001)

3、。外周血淋巴细胞DNA损伤分析结果显示,大鼠淋巴细胞DNA本底损伤均较低,低剂量铁组和对照组大鼠淋巴细胞DNA损伤分别为25.30AU和21.13AU,两组间无统计学差异(P>0.05),但中剂量和高剂量铁组大鼠DNA本底损伤分别达到了82.80AU和169.50AU,显著高于对照组(P值均<0.001);体外小剂量强氧化剂(H2O2)处理大鼠外周血淋巴细胞后观察H2O2对DNA氧化损伤的影响,结果显示对照组和低剂量铁组大鼠淋巴细胞DNA损伤分别为259.00AU和260.40AU,两组间无统计学差异(P>0.05),而中剂量和高剂量铁组大鼠淋巴

4、细胞DNA损伤水平较对照组分别达到了293.80AU和308.88AU,显高与对照组(P值均<0.001)。铁对雄性大鼠精子数量和质量影响分析显示,对照组大鼠精子数量为4.1×108/ml,低、中和高剂量铁组的精子数量分别为3.8×108/ml、3.1×108/ml、1.9×108/ml,其中高剂量铁组显著低于对照组(P<0.001);精子活动率结果显示,对照组大鼠精子活动率为77.0%,中剂量和高剂量铁组分别为49.8%和26.6%,显著低于对照组(P值均<0.001);精子畸形率结果显示,对照组大鼠精子畸形率为7.2%,高剂量铁组为11.8%

5、,显著高于对照组(P<0.001)。睾丸组织铁含量结果显示,对照组和低剂量铁组大鼠睾丸组织铁含量分别为16.02μmol/gprot和9.97μmol/gprot,两组间无统计学差异(P>0.05),而中剂量和高剂量铁组大鼠睾丸组织铁含量分别达到33.45μmol/gprot和75.39μmol/gprot,显著高于对照组(P值均<0.001)。氧化应激水平检测结果显示,高剂量铁组大鼠睾丸组织中SOD和CAT活性为170.84U/mgprot和1.38U/mgprot,显著低于对照组(P值均<0.05);中剂量和高剂量铁组大鼠睾丸组织中GSH-P

6、x分别为143.11酶活力单位和123.26酶活力单位,显著低于对照组(P值均<0.05);中剂量和高剂量铁组大鼠睾丸组织中MDA水平分别为6.16nmol/ml和7.88nmol/ml,显著高于对照组(P值均<0.001)。结论腹腔注射中剂量的铁可增加机体铁负荷水平,诱发机体淋巴细胞DNA本底损伤和氧化损伤。腹腔注射高剂量的铁可损伤雄性大鼠生殖功能,包括精子数量减少、精子运动率降低以及精子畸形率升高。因此,机体铁过载有害健康,应防止过量补充。硕士研究生何丽敏(营养与食品卫生学)指导教师马爱国教授关键词:DNA损伤;淋巴细胞;睾丸;精子;抗氧化A

7、BSTRACTObjective:Excessironcouldinduceoxidativestress,celloxygenation,tissuesandorgansdamage.Theaimofthestudywastoobservetheeffectsofdifferentdosesofironinlymphocyteandreproductivecapavityinmalerats.Methods:Atotalof40healthymaleWistarratsweredividedintofourgroupswith10ineachb

8、yweigh:controlgroup,low-doseirongroup,medium-doseirongroupandhigh-do

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