迎香穴埋线调节变应性鼻炎鼻黏膜神经源性炎症的实验研究

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1、学位论文迎香穴埋线调节＇变应性鼻炎鼻Ｉ占膜神经源性炎症的实验研究陈晴指导教师姓名：张勒修教授申请学位级别；博：ｔ：专业名称：中民五官科挙论文提交时间：２０巧年５月论义答巧时间：２０１５年５月二０—五年五月成都中医药大学博±学位论文中文摘要目的：通过动物实验探讨、验证迎香穴埋线调节变应性鼻炎（ＡｌｌｅｒｇｉｃＲＭｎｉｔｉｓ，ＡＲ）（ｎｅｕｒｏｅｎ鼻黏膜神经源性炎症ｇｉｃｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ）的机制假说迎香穴埋线产＂＂－迎香穴－Ｈ叉神经－生的刺激信号经蝶跨神经节鼻黏膜通路，抢先抑

2、制了鼻腔Ｃ类感觉神经纤维的传入冲动，抑制其轴索反射中感觉神经肤的释放，从而减轻变应性鼻炎鼻黏膜神经源性炎症反应，为穴位埋线治疗变应性鼻炎提供科学依据。方法：１．用卵清蛋白（ｏｖａｌｂｕｍｉｎ，ＯＶＡ）＋氨氧化错（Ａ１（０Ｈ）３）建立变应性鼻炎、－大鼠模型，采用大鼠行为学评分鼻腔黏膜和支气管组织苏木精伊红－、ｚｍ－ｅ（Ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎｅｏｓｉｎｓｔａｉｎｉｎｇ，ＨＥ）染色观察酶联免疫吸附法（ｅｎｙｅｌｉｎｋｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙ，ＥＬＩＳＡ）检查外周血ｓＩｇＥ水平进行模型评价。２．

3、采用辣根过氧化物酶（ＨｏｒｓｅｒａｄｉｓｈＰｅｒｏｘｉｄａｓｅＨＲＰ）洛液进行大鼠迎香，、穴注射，提取大鼠迎香穴组织Ｈ叉神经上颁支、Ｈ叉神经干、Ｈ叉神经孤、脊束核，蝶腾神经节、蝶腾神经，经四甲基联苯胺（ＴＭＢ）显色法后于显微镜．下观察阳性标志物情况。３．采用辣椒素（Ｃａｐｓａｉｃｉｎ）溶液滴鼻干预ＡＲ大鼠，免疫组织化学法检查各組大鼠鼻黏膜Ｐ物质（ｓｕｂｓｔａｎｃｅＰ，ＳＰ）、降巧素基因相关狀（ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎｅｎｅ－ｒｅｇｌａｔｅｄｅｔｉｄｅ，ＣＧＲＰ）、血管活性肋（ＶａｓｏａｃｔｉｖｅＩｎｔｅ她ｎａｌＰ

4、ｅｔｉｄｅ，ＶＩＰ）ｐｐｐ及血清神经肤Ｙ（ｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅＹ，ＮＰＹ）的水平。４．采用迎香穴埋线分干预ＡＲ大鼠，免疫组织化学法和费光实时定量ＰＣＲ－－（ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ，ＲＴＰＣＲ）方法检测各組大鼠鼻黏膜中ＳＰ、ＣＧＲＰ和ＶＩＰ的表达。分别于埋线１次、２次和３次后对比埋线姐和模型组表达差异，及与辣椒素干预后表达差异。结果：１．通过０ＶＡ＋Ａ１０Ｈ）３建立ＡＲ大鼠模型，模型组大鼠行为学评分明显升（高，鼻黏膜ＨＥ染色显示细胞间质结构奈乱，大量嗜酸性粒细胞等炎性因子浸润，１成都中医药大

5、学博±学位论文纤毛部分倒伏；血清ｓＩｇＥ水平升島。２．通过迎香穴注射ＨＲＰ溶液后，显微镜下在Ｈ叉神经上颂支鼻外侧分支、Ｈ叉神经上领支、王叉神经上背侧核和蝶聘神经节发现阳性标志物。３．辣椒素滴鼻干预ＡＲ大鼠后，干预組大鼠鼻黏膜中ＳＰ、ＣＧＲＰ和ＶＩＰ的平均光密度值较ＡＲ模型组明显减少，较正常对照组则仍有显著差异；干预组大鼠行为学评分较模型组明显降低，与正常对照组无明显差异；与正常对照组比。较，模型组大鼠血清ＮＰＹ水平明显升高，干预组则无明显变化４．迎香穴埋线干预ＡＲ大鼠后，埋线姐大鼠鼻黏膜中ＳＰ、ＣＧＲＰ平均光密

6、度值较模型组有明显下降，较空白姐仍有差异；而ＶＩＰ平均光密度值较模型组下降３。埋线组神经姐织中ＳＰｍＲＮＡ、ＣＧＲＰ，次埋线后与空白组无明显差异ｍＲＮＡ和ＶＩＰｍＲＮＡ的表达较模型均明显减少，与空白组对比仍有差异。结论：＂＂－－Ｈ叉神经－通路客观存１．神经示踪结果提示迎香穴蝶聘神经节鼻黏膜在；提供了形态学证据支持。２．ＡＲ模型组大鼠鼻戴膜、血清中神经狀的含量、鼻黏膜病变程度评分明＜〇显升高．〇，与空白組相比有统计学意义（Ｐ５），表明神经化参与了变应性鼻炎黏膜的神经源性炎症反应；３ＡＲ大鼠、黏膜病变程

7、度．给予辣椒素滴鼻干预后，鼻黏膜神经化的含量较模型姐相比有明显下降，提示辣椒素可＾＾降低ＡＲ大鼠鼻黏膜组织中神经肋的含量，进而减轻鼻黏膜炎症反应。４，．迎香穴埋线可降低ＡＲ大鼠鼻腔黏膜神经肋的含量及鼻黏膜病变程度，从功能上验证了假说与辣椒素干预效果相似。关键词：变应性鼻炎穴位埋线迎香穴感觉神经肤神经通路模型■２成都中医药大学博±学位论文Ａｂｓ化ａｃｔＯｂｅｃｔ：ＴｏｅｘｌｏｒｅａｎｄｖｅｒｔｉｔｈｅｈｏｔｈｅｓｉｓｔｈａｔｃａｔｕｔｉｍｌａｎｔａｔｉｏｎａｔＹｉｎｊｐｆｙｙｐｇｐ

8、ｇＸｉａｎｇａｃｕｏｉｎｔｃａｎａｄｕｓｔｔｈｅｎｅｕｒｏｅｎｉｃｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎｂａｌｌｅｒｉｃｒｈｉｎｉｔｉｓｒａｔｍｏｄｅｌ．