苯扎贝特对pbc患者外周血单核细胞的作用研究

《苯扎贝特对pbc患者外周血单核细胞的作用研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号Ｒ４４６学校代号１０５７２ＵＤＣ６０１密级公开学ｇ２０１２１１０２２８１，＊■．；．，；＇■？■，户抑（中虔編，＠＇巧ＧｕａｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ７．項硕ｄｒ学位论文苯化贝特对ＰＢＣ患者外周血单核细胞的作用巧究—＼学位申请人卢欣巧指导教师姓名专业名称胳床检验诊断学申请学位类型专业学位论文提交日期２０１５年４月‘■；．．．户Ｉ．．—，一？．

2、？．，，＇‘：＾、＇－Ｖ’ｒ？＇－？？＇ＶＩ、．？＇？，．．■．－？１？．Ｊ广州中医药大学学位论文原创性声明本人郑重声明，独立进行研究工作：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下所取得的成果。除文中己经特别加Ｗ注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中■｜＾１明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名＿＾＾§＾円期〇〇护年月苗曰关

3、于学位论义使用授权的声明本人完全了解广州中医药大学有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部口机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权广州中医药大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。（保密论文在解密后应遵守此规定）论支作者答名论支导师答名円期：刀ｎｒ年＾月火円７！摘要原发性胆汁性肝硬化（Ｐｒｉｍａｒｙｂｉｌｉａｒｙｃｉｒｒｈｏｓｉｓ，ＰＢＣ）是机体免疫耐受失控、自身免疫应答过高引起的肝脏自身免疫性疾病

4、。熊去氧胆酸（化ｓｏｄｅｏｘｙｃｈｏｌｉｃａｃｉｄ，一ＵＤＣＡＰＢＣ的一）是目前治疗线药物，但仍有部分患者对ＵＤＣＡ无应答。越来越多的临床报告显示苯扎贝特（Ｂｅｚａｆ化ｒａｔｅ，ＢＦ）Ｗ其良好的治疗效果和较小的副作用开始走进临床ＰＢＣ患者的治疗中，但其对于ＰＢＣ疾病的具体作用机制尚缺乏系统的研究。固有免疫是机体防御及获得性免疫应答的基础，单核细胞作为其中主要的效应细胞，其蒋有的表型特征及功能特点在ＰＢＣ的发病过程中担任着重要的角色，我们前期对ＰＢＣ患者外周血单核细胞的研究结果显示ＰＢＣ中存在单核细胞亚群的失衡，其与肝

5、损伤、炎症指标及Ｔｈｌ细胞的分化均密切相关。因此，即能否作用于单核细胞上，一？从机体过度免疫应答触发的早期阻止ＰＢＣ的进步发展目前还没有相关的研究报道。目的；观察邸对阳Ｃ患者外周血中单核细胞表型和功能的影响，及ＢＦ是否能通过调控＋一单核细胞从而进步影响邸４Ｔ．细胞分化，并且探讨其潜在的分子化制，为ＢＦ抗ＰＢＣ的研究提供一个新的视角和实验室依据。方法；１ｅｒａ．ＰＢＣ患者外周血２０ｍｌ（Ｐｉｅｒｌｂｌｏｏｄ采集，分离外周血单个核细胞ｐｈ＋一ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｃｅｌｌＰＢＭＣ，步分选出ＣＤ１４，，，）进

6、单核细胞Ｗ不加药处理作为对照组０－其余分别加入不同浓度的ＢＦ（５ＵＭ、ｌＯＯｕＭ、２００ＰＭ）培养４她，ＲＴＰＣＲ技术检测－－－ＣＤ１６、ＴＮＦａ、比１目、６各ｍＲＮＡ水平的表达ＣＤ化、化，流式细胞术检测单核细胞ＣＤ８０－、ＣＤ８６和ＨＬＡＤＲ的表达频率及细胞调ｔ：情况。＋＋２．分离阳Ｃ患者的郎ＭＣ，从中分选出ＣＤ１４单核细胞、ＣＤ４Ｔ细胞，将ＢＦ预处理＋＋ＣＤ４Ｔ细胞共ＦＮ－组与未经ＢＦ处理的ＣＤ１４单核细胞分别与培养，流式细胞术检测ＩＹ＋＋＋＋＋＋ＣＤ４Ｔ化－－（１）细胞、比１７ＣＤ４Ｔ（Ｔｈｌ７）细胞比例

7、及Ｋｉ６７ＣＤ４Ｔ细胞频率；采用Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ细胞培养技术重复上述共培养实验，流式细胞术检测Ｔｈｌ细胞频率；－比－口的５－－ＲＴＰＣＲ检测ＢＦ作用下单核细胞中、比１２ｐ４０和比１８各ｍＲＮＡ的表达水平。结果：１．ＢＦ在本实验浓度范围内对ＰＢＣ患者外周血中单核细胞无明显的细胞毒性（Ｐ＞０．０５）；２．ＢＦ呈浓度依赖性抑制ＰＢＣ患者单核细胞上ＣＤ１６的ｍＲＮＡ水平和蛋白水平（Ｐ＜化０５），尤其在２００ｕＭ的ＢＦ干预浓度下，二者的抑制率分别为４４％和说％；３－ａ－－．邮呈浓度依赖性抑制ＰＢＣ患者单核细胞促炎因子、化

8、１、ＩＬ６，如ＴＮＦ０的ｍＲＮＡ７ｊＣ平（Ｐ＜０．０１），在２００ｌｉＭ浓度的处理下，其抑制程度分别为４９％、５